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请教亚油酸过氧化抑制率——亚油酸硫氰化钾法出现沉淀问题
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实验过程 Ai:在具塞试管中依次加入1.50mLpH7.0磷酸盐缓冲液,100μL稀释后水解液,100μL50mmol/L亚油酸乙醇溶液和50μL25mmol/LFeCl2-EDTA溶液,在温度为50℃,100r/min的恒温水浴摇床上避光保持5~6h。 取上述溶液200μL,加入6.00mL75%乙醇,200μL0.2mol/LFeCl2溶液,200μL30%KSCN溶液,混合均匀,反应5min后,在480nm处测定加水解液的吸光度为Ai; A0:用100μL 无水乙醇(也用超纯水试过)代替100μL稀释后水解液: 问题 1、按上述步骤结果均产生沉淀,且无血红色络合物出现 2、变换过水解液及亚油酸浓度均无效果 3、若取20μL摇床后样品,其他不变,有时会产生红色,但仍有沉淀 4、若不加FeCl2-EDTA摇床,沉淀不明显,但仍无颜色,或取20μL摇床后样品,其他不变,有时会产生红色 5、空白也为上述现象 请教各位亚油酸摇床后与Fe离子产生什么特殊物质,使其为被氧化成三价Fe与KSCN反应吗?为什么我的实验会有上述现象,有什么解决办法或建议吗? 期待您的回复,万分感谢! |
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