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dxjyaojiayou

新虫 (小有名气)

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[求助] 发酵罐空培养染菌问题已有15人参与

我现在空培养发酵罐2到3天，（用的是LB培养基,没接种）。
发现溶氧从100降到2左右，然后无菌取样镜检，显微镜检查发现有细杆状菌，判定染菌。
于是我考虑
1.可能是空气过滤器的问题，在发酵罐配置了3级过滤器（除菌，除水，除固体杂质）。
2.各个阀门已经检查，没有泄露。
3.发酵培养基也换了几种（怀疑培养基没灭干净，加长时间）。
还是没解决问题。。。好无助，求大家帮忙分析一下原因。。。非常感谢

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1楼 2014-09-05 17:05:11

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ls2046

铁杆木虫 (职业作家)

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【答案】应助回帖

染菌，无外乎两个方面，罐内和罐外
罐内：1、罐子彻底清洗干净（尤其是搅拌桨、挡板和进风口），无残留。2、LB培养基，清液，121℃，20min肯定没有问题，可以忽略培养基问题。
罐外：一切可能与空气接触的地方均要严格检查。最大的嫌疑是进风，即使已经尝试很多，但个人觉得还是它的嫌疑最大。空气无菌的最大保障是精过滤器的正常工作，但是灭菌操作不规范或过滤器崩漏等会导致过滤器进水并失效。
针对该点排除方法：建议灭菌后，保持压力，只搅拌不通风，测定染菌是否发生或时间是否延长，以判断是否是风有问题，还是罐内自身问题，逐一排查。ok。