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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 细胞培养
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ghjzero

木虫 (正式写手)

[交流] 细胞培养 已有3人参与

各位，我是细胞培养的新手，有些关于细胞培养的问题希望和大家交流下，共勉~~~~
1.对贴壁细胞而言，倒置显微镜下，生长状态比较好的细胞形态如何（发亮的还是发暗）？细胞分裂的状态又如何？我的观察是细胞发亮似乎有生长不良的趋势 。
2.我的细胞生长的很慢，原代组织培养10天左右才迁出细胞，传代也是10天左右才长满培养瓶底部的40%，为什么细胞长得如此慢？
3.综合以上2的情况，10天左右细胞培养液的颜色基本上没有发生变化，也很清澈（没有浑浊），测量PH在7.4左右，是不是意味着我不用更换培养液？
4.原代组织培养，视野中有很多组织碎片，该如何处理？（感觉会影响细胞的生长）
各位畅所欲言，交流共勉！
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Just do it!
1楼 2014-09-05 10:11:25
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ghjzero

木虫 (正式写手)
这么好的帖子，赶紧顶起！
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Just do it!
2楼2014-09-07 10:49:26
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爱笑的Q

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我在养A431，为贴壁生长，也出现相似情况，细胞状态不好，而且总是有漂浮细胞。考虑到是谷氨酰胺可能分解，就用4mM L-Glutamine，两次换液后漂浮细胞减少啦，但细胞生长速度并无改变。怀疑是营养不够，就在添加10%血清的基础上另外添加5%血清，要等段时间才有结果。   希望能够相互分享心得。
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3楼2014-09-09 16:06:43
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金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
细胞生长慢的话可能是你的细胞密度太低，贴壁生长的细胞密度低了影响繁殖速度，培养基是要换的根据你的细胞量和生长速度来定的，总之培养基必须保证细胞生长需要的营养而且还要及时把细胞生长产生的废物去除，原代我不熟
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4楼2014-09-09 16:58:57
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ghjzero

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 爱笑的Q at 2014-09-09 16:06:43
我在养A431，为贴壁生长，也出现相似情况，细胞状态不好，而且总是有漂浮细胞。考虑到是谷氨酰胺可能分解，就用4mM L-Glutamine，两次换液后漂浮细胞减少啦，但细胞生长速度并无改变。怀疑是营养不够，就在添加10%血 ...

相互学习，多多交流~~
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Just do it!
5楼2014-09-10 10:50:03
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lu_lu

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
原代不大熟
但是 贴壁细胞状态好 首先贴的好  细胞展开   透亮 分布均匀  
长得慢可能和原代有关  但本身也说明细胞生长不旺盛  状态一般
培养基虽然ph不低 但是时间长了代谢产物积累 抑制生长  5天基本就要换一换
有碎片  如果细胞贴的牢  可以倒掉培养基 然后用PBS清洗
以上个人看法 希望帮到你
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6楼2014-09-12 22:44:19
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