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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 重组菌表达外源蛋白从摇瓶发酵到发酵罐放大试验时不再表达出目的蛋白
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小豆芽_won

银虫 (小有名气)

[求助] 重组菌表达外源蛋白从摇瓶发酵到发酵罐放大试验时不再表达出目的蛋白 已有1人参与

大肠杆菌BL21表达一个外源蛋白，在摇瓶上试验时有目的蛋白的表达，但相同的条件在发酵罐上为什么就没有目的蛋白了呢？发酵罐上菌体浓度也没有很高，求解！
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1楼 2014-09-03 20:19:52
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wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
菌浓度不高导致的吧。摸索一下发酵罐的培养条件参数，要知道摇瓶和发酵罐是有本质区别的。你要摸索诸如通气量，搅拌转速，培养基添加形式和量，还有等等很多的因素。长期奋斗吧。
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2楼2014-09-04 17:23:16
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小豆芽_won

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wolfman840 at 2014-09-04 17:23:16
菌浓度不高导致的吧。摸索一下发酵罐的培养条件参数，要知道摇瓶和发酵罐是有本质区别的。你要摸索诸如通气量，搅拌转速，培养基添加形式和量，还有等等很多的因素。长期奋斗吧。

菌体浓度确实没有很高，我要表达的蛋白是胞内蛋白，需要做高密度培养的。通气和搅拌转速我是根据溶氧来调节的，可能培养基本身就没有优化的很好（以前师兄做过一些），慢慢摸索中。。。谢谢你的解答！
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3楼2014-09-04 22:16:09
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wolfman840

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小豆芽_won at 2014-09-04 22:16:09
菌体浓度确实没有很高，我要表达的蛋白是胞内蛋白，需要做高密度培养的。通气和搅拌转速我是根据溶氧来调节的，可能培养基本身就没有优化的很好（以前师兄做过一些），慢慢摸索中。。。谢谢你的解答！...

祝你成功
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4楼2014-09-09 15:32:45
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