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conanzzz

木虫 (正式写手)

[求助] 细胞计数时离心管或培养皿对细胞吸附问题严重 已有1人参与

RT,磁球抓捕细胞实验,利用血球计数板对细胞进行计数,但是发现在投入细胞10e5个/mL时,抓捕细胞加上上清中的细胞数目总和已经达不到投入细胞的一半数目了;于是将细胞在1毫升培养皿或者1.5毫升离心管中稀释(不涉及磁球)后先后计数多次,发现每次计数数目都不同,随着放置时间延长计数得到的数目越来越少(悬浮细胞不涉及贴壁,用0.01MPBS稀释,并且每次计数前都用1000uL枪头吹打30-50次尽量均匀),因此推测培养皿和离心管在10分钟内就对细胞有极大的非特异性吸附,不知道大家有没有什么建议能解决该问题,建议有效的话会追加金币的,十分感谢!!!
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conanzzz

木虫 (正式写手)

自己顶一顶,木有人给点意见嘛?
2楼2014-09-02 11:26:17
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xmccsawr

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
conanzzz: 金币+3, 有帮助 2015-04-27 13:50:11
我一般会先将要计数的细胞先转移到EP管中。每次计数前将EP管充分混匀,静置5秒。后取中层的来计数。
3楼2015-04-26 21:17:34
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conanzzz

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by xmccsawr at 2015-04-26 21:17:34
我一般会先将要计数的细胞先转移到EP管中。每次计数前将EP管充分混匀,静置5秒。后取中层的来计数。

收到,谢谢~~
4楼2015-04-27 13:49:41
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