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liangjiwang

[交流] 求助-外切葡聚糖酶基因克隆

我用功能克隆法筛选外切葡聚糖酶基因。
外切葡聚糖酶的活性克隆参考Heptinstall的方法,
1.将文库克隆影印到LA平板上于37℃培养12~16h后
2.用含有0.04% 4-MUC的琼脂糖溶液(0.6%)倒上层平板,37℃培养1h后
3.紫外灯下观察到菌落周围显荧光者即为阳性克隆。
4.挑选阳性克隆检测其是否具有β-葡萄糖苷酶的活性,如果没有则可能为表达外切葡聚糖酶的活性的克隆。

但是4-MUC价格太昂贵了,导师让我换方法。最近查了很多文献,就是查不到新方法。望哪位高手能帮帮忙!
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