| 查看: 7183 | 回复: 97 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
shxteacher铁杆木虫 (正式写手)
|
[交流]
PYD1重组质粒转化酿酒酵母后为什么长出的阳性斑PCR扩不出目的片段？ 已有1人参与
|
||
|
跟别人交换了pYD1酿酒酵母质粒，按照pYD1的操作手册，将目的基因连接至pYD1，构建好了重组质粒，并测序验证正确。 然后木有线性化（根据操作手册中的描述，不需要线性化），直接转入EBY100酿酒酵母感受态细胞中， 用Trp-（色氨酸缺陷）平板筛选，能长出粉色菌落，本人不知道是否正确？但是EBY100感受态细胞无法在trp-平板上长出菌落。 然后挑取单菌落，转至trp-液体培养基中培养，培养物离心后，依旧是粉色培养物。 但是用试剂盒提取基因组后，却无法PCR得到我目的基因片段，为什么PCR不出来？ （pYD1酿酒酵母质粒 和 EBY100均是跟别人换来的） 不知道各位科研同仁遇到这样的情况木有？ 请各位大虾给点指点，实在想不通，万分感谢。  pYD1重组质粒转化后的粉色菌落.png |
回复此楼» 猜你喜欢
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有291人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
化工申博
已经有3人回复
-
申博自荐
已经有3人回复
-
广西民族大学化学化工学院化学工程与技术学硕，材料化工专硕调剂名额充足！
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
★
shxteacher(金币+1): 谢谢参与
shxteacher(金币+1): 谢谢参与
 支持 |
41楼2014-08-29 18:55:39
5