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w4w3

木虫 (小有名气)

[交流] 求助混合抗原免疫产生抗体

假设若干种蛋白组成的混合物有抑菌活性但无法确定是哪种蛋白有活性,是否可以将蛋白混合物作为混合抗原免疫动物,获得多克隆抗体后再用混合抗体来确定是哪种蛋白有抑菌活性?如何利用混合抗体找到有特定活性的抗原?
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随风而过

银虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
w4w3(金币+5,VIP+0):多谢,我考虑继续纯化
建议楼主通过各种方法看是否能够将混合蛋白分离,然后得到单抗一一分析,首前跑个蛋白电泳看看蛋白分子量的分布,然后应该可以分出几部分,然后通过离子交换等方法看能不能再细分。实在没办法,我觉得你不妨试试1楼的方法。
4楼2008-04-16 09:13:57
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AFM

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
w4w3(金币+5,VIP+0):多谢,我考虑继续纯化
最好根据蛋白的特性继续将蛋白混合物分开,哪怕只分得两种蛋白的混合物。
还有个方法很费时、费力:分别用大肠杆菌表达每一种蛋白,分离纯化,鉴定其抑菌作用。或者用其免疫动物,获得单克隆抗体,然后分离你的蛋白混合物。
不要和我比懒,我懒得和你比。
2楼2008-04-15 13:06:05
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yufuxian

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★
w4w3(金币+5,VIP+0):多谢,我考虑继续纯化
好象楼主的方法行不通啊,你用若干种蛋白的混合物免疫获得的抗体是抗这多种蛋白的,并不是针对其中一个蛋白的啊,你能不能过柱子分别分离这些蛋白的每一个组分,收集不同的峰,用不同的收集液来做抑菌实验
3楼2008-04-16 08:28:49
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w4w3

木虫 (小有名气)

多谢各位赐教,我会考虑继续纯化。
5楼2008-04-16 10:22:03
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