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令狐少陈

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
梦锁深秋2005: 金币+2 2014-09-01 08:20:19
这种情况我也遇到过,感觉最后虽然P出来了,但也没找到核心问题,但是建议换酶试试,说实话,实验室很多人,最后这种问题解决的方法似乎都是换引物和换酶。
多多交流,海纳百川
11楼2014-08-27 23:07:20
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梦锁深秋2005

银虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by a50044758 at 2014-08-27 22:55:53
换酶!反应体系里面加DMSO!

DMSO 按多少量加啊
12楼2014-08-31 19:21:10
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梦锁深秋2005

银虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by loveerobin at 2014-08-27 16:57:48
多设计几对引物
进行梯度PCR扩增试试
另外,扩增基因不是提了RNA反转录吗?

额。。。。本人没做过细菌,这个没有想到,回头去查查,多谢
13楼2014-08-31 19:23:04
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梦锁深秋2005

银虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 令狐少陈 at 2014-08-27 23:07:20
这种情况我也遇到过,感觉最后虽然P出来了,但也没找到核心问题,但是建议换酶试试,说实话,实验室很多人,最后这种问题解决的方法似乎都是换引物和换酶。

酶倒是换过,结果倒是有条带,只是杂带相当多啊
14楼2014-08-31 19:24:10
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a50044758

银虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 梦锁深秋2005 at 2014-08-31 19:21:10
DMSO 按多少量加啊...

终浓度的2%,50ul体系加1ul DMSO,介绍个挺厉害的酶你,phanta,扩的时候加上包装里面的PCR enhancer,我还没有遇到过P不出来的情况。
15楼2014-08-31 22:59:06
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梦锁深秋2005

银虫 (小有名气)

引用回帖:
15楼: Originally posted by a50044758 at 2014-08-31 22:59:06
终浓度的2%,50ul体系加1ul DMSO,介绍个挺厉害的酶你,phanta,扩的时候加上包装里面的PCR enhancer,我还没有遇到过P不出来的情况。...

多谢
16楼2014-09-01 08:19:57
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2015sky

新虫 (初入文坛)

我有个问题,我都已经鉴定出我的菌是某种乳酸菌了,但是再用该种菌的特异性引物PCR,就是没条带,是怎么回事呢,求大侠指点
17楼2014-11-22 11:34:51
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