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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 质粒的存储方法
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夏夜微风

木虫 (正式写手)

[求助] 质粒的存储方法 已有5人参与

一般pUC质粒直接是放到冰箱里保存，还是先转化进大肠杆菌中，再保藏菌株呢？如果是转化菌株的话，那么，pY系列质粒是转化大肠杆菌中贮藏，还是要转化酿酒酵母中进行贮藏呢？求大神们指教啊！
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还未成熟，就已老去！
1楼 2014-08-23 11:32:19
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huyan0817

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
夏夜微风: 金币+2 2014-08-24 22:47:19
质粒保存方法：
      短期：质粒直接负20度（可以随时用）
      中期：转到大肠杆菌中制成甘油菌负80度或者液氮保存（可以复苏菌种提取质粒，但是传代多了容易丢失质粒）
      长期：干粉负80度保存质粒或者无水乙醇保存质粒（不出意外质粒可以一直保存下去）
如果质粒比较重要最好都选择保存。
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11楼2014-08-24 22:13:14
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ncuduhan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
夏夜微风(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-23 20:26:44
夏夜微风: 金币+1 2014-12-09 17:57:54
一般情况下，质粒可以-20°保存，但是保险的做法还是放到菌里面保存。把菌放到-80°保存，到时候要用的时候直接复苏就可以了！
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2楼2014-08-23 13:14:16
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夏夜微风

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ncuduhan at 2014-08-23 13:14:16
一般情况下，质粒可以-20°保存，但是保险的做法还是放到菌里面保存。把菌放到-80°保存，到时候要用的时候直接复苏就可以了！

我也是想放到菌里面，但是质粒会不会丢失呢；但是单单放质粒，又怕它不小心机械震断！
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还未成熟，就已老去！
3楼2014-08-23 13:21:16
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ncuduhan

银虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 夏夜微风 at 2014-08-23 13:21:16
我也是想放到菌里面，但是质粒会不会丢失呢；但是单单放质粒，又怕它不小心机械震断！...

就是一般你摇起来的菌液取出大部分抽提质粒，酶切验证正确的话就把剩下的菌液冻存啊！质粒不会丢失的。单放质粒短期还行，但是长期就不行了~
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4楼2014-08-23 13:45:33
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