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zengsihai

木虫 (小有名气)

iloveemuch

[求助] 请虫友为我对进口大豆植物检疫中检疫性真菌病害的实验支招

各位虫友:
     您们好。
      小弟多年来在口岸植物检疫实验室从事进口大豆植物检疫,一直关注美洲转基因大豆里的检疫性真菌病害,目前正在关注我国官方里的检疫性真菌病害:主要有:大豆北方茎溃疡病菌、大豆南方茎溃疡病菌、大豆北方猝死病菌、大豆南方猝死病菌、菜豆疫霉、大豆疫霉、大豆茎褐腐病菌等。分离材料为进口大豆下脚料中的茎秆,分离方法为表面消毒后组织分离法,然而分离做了多轮次实验,想从大豆茎秆中众多的真菌中找到我想要的检疫性真菌,好难啊。工作量大不说,分离要不断地纯化,等子实体长出来,才能考虑要不要走下一步的分子鉴定。小弟想问的问题有:
    1.对于找检疫性病原菌,特别是检疫性真菌,如何才能提高工作的效率,我目前主要关注:大豆北方茎溃疡病菌、大豆南方茎溃疡病菌(间座壳属Diaporthe phaseolorum )和大豆茎褐腐病菌(瓶霉属Phialophora gregata )这两种真菌,可以寄生在进口大豆的茎秆上。我目前还是(照文献上叙述的那样):抠住症状,然后分离,纯化,培养等子实体,镜检,然后摇菌培养,提DNA,PCR,电泳,送测序,BLASTN   
   2.在真菌鉴定上,如何在大量的分离材料中找到我想要的目的菌,可有虫友为我支招。
  3.不知道是否有虫友在从事大豆病害的研究,如有,愿意与您在实验方面长期分享信息。
  4.难者不会,会者不难,我分离获得的一些真菌,BLASTN比对后,是检疫性真菌的近似种,不是检疫性真菌。科赫法则也走了,显症,但是是随机显症。
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zengsihai
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zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

对于很多病原菌,目前有快速的诊断技术。比如,提取待检测组织的DNA,使用特异性PCR引物进行检测,等等。结果阳性之后走上述流程,可以进一步确定。

检疫一开始就用传统流程,太慢了吧。。。
做一个阳光、开朗的小和尚
2楼2014-08-25 11:35:53
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Bigstar111

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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3楼2018-06-20 20:37:51
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