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zengsihai木虫 (小有名气)
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[求助]
请虫友为我对进口大豆植物检疫中检疫性真菌病害的实验支招
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各位虫友： 您们好。 小弟多年来在口岸植物检疫实验室从事进口大豆植物检疫，一直关注美洲转基因大豆里的检疫性真菌病害，目前正在关注我国官方里的检疫性真菌病害：主要有：大豆北方茎溃疡病菌、大豆南方茎溃疡病菌、大豆北方猝死病菌、大豆南方猝死病菌、菜豆疫霉、大豆疫霉、大豆茎褐腐病菌等。分离材料为进口大豆下脚料中的茎秆，分离方法为表面消毒后组织分离法，然而分离做了多轮次实验，想从大豆茎秆中众多的真菌中找到我想要的检疫性真菌，好难啊。工作量大不说，分离要不断地纯化，等子实体长出来，才能考虑要不要走下一步的分子鉴定。小弟想问的问题有： 1.对于找检疫性病原菌，特别是检疫性真菌，如何才能提高工作的效率，我目前主要关注：大豆北方茎溃疡病菌、大豆南方茎溃疡病菌（间座壳属Diaporthe phaseolorum ）和大豆茎褐腐病菌（瓶霉属Phialophora gregata ）这两种真菌，可以寄生在进口大豆的茎秆上。我目前还是（照文献上叙述的那样）：抠住症状，然后分离，纯化，培养等子实体，镜检，然后摇菌培养，提DNA，PCR，电泳，送测序，BLASTN 2.在真菌鉴定上，如何在大量的分离材料中找到我想要的目的菌，可有虫友为我支招。 3.不知道是否有虫友在从事大豆病害的研究，如有，愿意与您在实验方面长期分享信息。 4.难者不会，会者不难，我分离获得的一些真菌，BLASTN比对后，是检疫性真菌的近似种，不是检疫性真菌。科赫法则也走了，显症，但是是随机显症。 |
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