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少_平

木虫 (正式写手)

[交流] 请教两种10×PCR buffer的区别?KCL vs (NH4)2SO4 已有3人参与

从thermo购买Taq酶,里面有两种不同的buffer,一种含KCL,另外一种含(NH4)2SO4,请问两个buffer在使用上有什么区别没?网上找了半天没找到合适的解释,望高手解答!
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bio_sci

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★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-20 09:57:11
那是你没找对文献啊,钾离子是促进扩增,铵离子是降低tm值

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-08-20 08:37:07
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少_平

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bio_sci at 2014-08-20 08:37:07
那是你没找对文献啊,钾离子是促进扩增,铵离子是降低tm值

谢谢回复,请问能告诉我下文献吗 我好好学习下
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3楼2014-08-20 09:17:35
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小鱼要化龙

铁杆木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
貌似(NH4)2SO4特异性好,KCL易扩。。。但同求文献啊!!!
4楼2014-08-20 22:04:26
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baronwhy

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
http://wenku.baidu.com/link?url= ... Sy_njHC8De43KxUuzVS
"NH4+ K+都会影响PCR,增加K+的浓度后, 会因为中和了核酸骨架上磷酸基团的负电荷而影响退火的温度,从而降低了PCR的严谨性(stringency),NH4+也有相同的作用. MBI公司的TAQ酶就提供了两种BUFFER, 一种是加Mg的一种是已经混合了(NH4)2SO4的,当然, 过高的阳离子浓度(KCL>0.2M)时, DNA在94度根本不会发生变性, 当然也就无从谈起PCR了"

没提到NH4+和K+的区别啊???
5楼2014-08-22 09:10:58
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