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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助:碱裂解法提取质粒用的溶液I\II\III是否需要灭菌?
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cmh79

银虫 (小有名气)

[交流] 求助:碱裂解法提取质粒用的溶液I\II\III是否需要灭菌?

问题如题!以前做提取直接拿了溶液就去提取了,现在自己操作发现这个问题NA提取中涉及的一些溶液要不要先灭菌?

还有一个问题:抗生素配制------一般说是过滤除菌,有没有具体的操作流程(比如注射器是不是灭菌\ 用的是什么水等),如果我不灭菌,直接在超净工作台上配制呢?
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1楼 2008-04-13 08:27:43
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brassica227

铁虫 (小有名气)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
质粒用的溶液I、III是需要灭菌的，至于2我一般不灭，过滤灭菌用灭菌过的针头或一次性的针头（已自动灭好）
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2楼2008-04-13 08:51:13
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fengyan

木虫 (小有名气)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
我一般溶液I灭菌用，分子克隆上写了没敢不按要求做。至于抗生素过滤除菌一般用水溶的需要过滤，即使是在超净工作台上配制也要过滤（除非你的抗生素是医用的，本来就无菌，并且水也是灭菌的，可能可以吧），乙醇溶的不需要过滤。
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3楼2008-04-13 09:50:17
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yellow.

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
I\II\III需要灭菌，按分子克隆的要求做就行了
抗生素最好滤菌，尤其是在分子实验室，含抗性的菌很多，易污染
注射器不能灭菌，我灭过一次，温度高报废了
可以用无菌水，直接滤到灭过菌的小EP管里就行了
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4楼2008-04-13 10:49:33
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maria229

木虫 (著名写手)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
I\II\III都不需要灭菌，但是最好要过滤除杂菌，我一直这样用，绝对没问题的
注射器无需灭菌，只要保证滤器滤膜和EP管无菌就可以了
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5楼2008-04-13 11:28:31
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cmh79

银虫 (小有名气)
谢谢各位的帮助

今天已经配了一部分，明天继续
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6楼2008-04-13 20:48:20
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wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户
I灭菌，II现用现配，II III里基本不会长菌。注射器无需灭，其实只要用灭菌水在超净台里配了就行，冰箱里保存基本也不会污染。
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金币是赌出来的
7楼2008-04-14 08:32:21
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qinying

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by wjswj at 2008-4-14 08:32:
I灭菌，II现用现配，II III里基本不会长菌。注射器无需灭，其实只要用灭菌水在超净台里配了就行，冰箱里保存基本也不会污染。

同意
另外,现在质粒提取试剂盒超便宜,效果又好,楼主干脆别费劲,直接使好了
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云在天边，水在瓶。
8楼2008-04-14 11:06:39
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