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cmh79

银虫 (小有名气)

[交流] 求助:碱裂解法提取质粒用的溶液I\II\III是否需要灭菌?

问题如题!以前做提取直接拿了溶液就去提取了,现在自己操作发现这个问题NA提取中涉及的一些溶液要不要先灭菌?

还有一个问题:抗生素配制------一般说是过滤除菌,有没有具体的操作流程(比如注射器是不是灭菌\ 用的是什么水等),如果我不灭菌,直接在超净工作台上配制呢?
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brassica227

铁虫 (小有名气)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
质粒用的溶液I、III是需要灭菌的,至于2我一般不灭,过滤灭菌用灭菌过的针头或一次性的针头(已自动灭好)
2楼2008-04-13 08:51:13
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fengyan

木虫 (小有名气)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
我一般溶液I灭菌用,分子克隆上写了没敢不按要求做。至于抗生素过滤除菌一般用水溶的需要过滤,即使是在超净工作台上配制也要过滤(除非你的抗生素是医用的,本来就无菌,并且水也是灭菌的,可能可以吧),乙醇溶的不需要过滤。
3楼2008-04-13 09:50:17
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yellow.

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
I\II\III需要灭菌,按分子克隆的要求做就行了
抗生素最好滤菌,尤其是在分子实验室,含抗性的菌很多,易污染
注射器不能灭菌,我灭过一次,温度高报废了
可以用无菌水,直接滤到灭过菌的小EP管里就行了
4楼2008-04-13 10:49:33
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maria229

木虫 (著名写手)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
I\II\III都不需要灭菌,但是最好要过滤除杂菌,我一直这样用,绝对没问题的
注射器无需灭菌,只要保证滤器滤膜和EP管无菌就可以了
5楼2008-04-13 11:28:31
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cmh79

银虫 (小有名气)

谢谢各位的帮助

今天已经配了一部分,明天继续
6楼2008-04-13 20:48:20
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wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户

I灭菌,II现用现配,II III里基本不会长菌。注射器无需灭,其实只要用灭菌水在超净台里配了就行,冰箱里保存基本也不会污染。
金币是赌出来的
7楼2008-04-14 08:32:21
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qinying

木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by wjswj at 2008-4-14 08:32:
I灭菌,II现用现配,II III里基本不会长菌。注射器无需灭,其实只要用灭菌水在超净台里配了就行,冰箱里保存基本也不会污染。

同意
另外,现在质粒提取试剂盒超便宜,效果又好,楼主干脆别费劲,直接使好了
云在天边,水在瓶。
8楼2008-04-14 11:06:39
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