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华农夏田

铁虫 (正式写手)

[交流] hela转染 已有2人参与

hela转染无荧光,同样的293T有,转染试剂确定可转染HELA,难道跟这个细胞亚型有关系?
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要科研也要生活
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西湖鸟

新虫 (初入文坛)

★
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只看荧光不准的,还是要以转染后48hqPCR检测敲除效率或者72h蛋白水平检测为准。我做Hela和293都是用的RFect小核酸转染方法,没看荧光,直接48hqPCR检测敲除90%以上。
2楼2018-10-17 14:41:12
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别踩我的菜

新虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我以前做的是Hela增殖表皮癌细胞转染,一般情况下接种后24小时内(细胞处于对数生长期)进行转染,转染前用opti—MEM洗 细胞两次,然后进行转染,转染5、6个小时后要观察细胞状态,如果有太多细胞漂起来就应该及时换成MEM,也可以使用RFECT转染,因为我们用的更多的还是在接种时就用这种无血清培养基,或许楼主可以试试。
3楼2019-03-27 15:06:57
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