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happydove

新虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★
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354929697(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-16 12:47:08

第一次提吧，先看一下RNA提取注意事项吧，多提几次就好了。
提得多了，熟练了，动作又规范又快就好了。
DNA污染，看看是否对你下步实验有影响。有的话加酶去掉就可以。

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11楼2014-08-15 14:31:44

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zengsihai

木虫 (小有名气)

iloveemuch

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【答案】应助回帖

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354929697(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-16 12:47:22

估计是没有提纯，我之前做真菌经常出现拖带，分析原因是有蛋白质。建议，提取后的RNA做一下核酸蛋白分析，确定一下能否用。

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zengsihai

12楼2014-08-15 17:03:56

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shuihaizi

金虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

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354929697(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-08-16 12:47:47

1，适当提高样品的量，如果提取之前样品总量很少，提出的RNA容易弥散
2，检查你所用的所有试剂，凡是自己配的试剂，DEPC水可能效果不好了，更换试试
3，加Trizol后，氯仿抽提两次试试，效果会好些；取上清时，少取，不要贪多，会减少DNA及蛋白污染

提取后，测浓度，如果按比例稀释，浓度成比例变化，那你提取的RNA基本是没有问题的

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13楼2014-08-15 21:35:11

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毅坚

新虫 (初入文坛)

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你好，本人是生工提取RNA的，不知道你的RNA后续是做什么精密实验。就我们公司而言，这样的RNA做荧光定量是没有问题的。注意提取过程中的一些小操作细节，如带口罩，吸液，取样均一等，润色一下应该可以达到你们工程师的要求吧。祝您顺利！

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14楼2014-08-17 09:30:27

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bio_sci

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不知道你提的是什么真菌，如果是酵母类的单细胞真菌，建议用液氮冻融几次，再用trizol破菌抽提，如果是植物类大型真菌或者是丝状真菌，那我建议你用液氮好好磨一下，你这个结果明显基因组dna太多了，这个会严重干扰的，没法往下做。你也可以试着用dna酶处理一下，但一定要是rna酶free的，否则你的rna就尸骨无存了。

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15楼2014-08-17 10:40:39

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