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coffee159

金虫 (小有名气)

[求助] 噬菌体污染 已有2人参与

实验室之前有被噬菌体污染过,可最近别人摇菌都能摇起来,而我摇的总是能死掉一半,还有就是寄到别的实验室的甘油菌,在那边也摇不起来,应该就是确定是菌种被噬菌体污染了。请问一下噬菌体能污染质粒吗?用以前的质粒重新转化可以吗?谢谢
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bigboy2050

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
coffee159(laozuzunzhe代发): 金币+5, 鼓励应助! 2014-08-14 17:31:46
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2014-09-10 14:11:29
1、先做个噬菌体检查(发酵液铺平板,查看有无噬菌斑),确认是否被污染。
2、确认污染后,应该对环境及所有器皿做消毒处理,特别是一些细节的无菌处理非常重要,自己可以根据工作流程好好想一下。
3、重新分离纯化菌株,挑选未被污染菌株,或抗性菌株。
4、噬菌体寄生在有生命的细胞或芽孢内,没有宿主的话其遗传物质应该不会整合到质粒里。
职业无分贵贱,做事要有格调
2楼2014-08-14 11:39:00
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coffee159

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bigboy2050 at 2014-08-14 11:39:00
1、先做个噬菌体检查(发酵液铺平板,查看有无噬菌斑),确认是否被污染。
2、确认污染后,应该对环境及所有器皿做消毒处理,特别是一些细节的无菌处理非常重要,自己可以根据工作流程好好想一下。
3、重新分离纯 ...

恩,谢谢你,我准备重新转化质粒试试。还有,怎么没有找到奖励金币的地
3楼2014-08-14 15:52:32
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laozuzunzhe

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by coffee159 at 2014-08-14 15:52:32
恩,谢谢你,我准备重新转化质粒试试。还有,怎么没有找到奖励金币的地...

因为他没有点“确定回帖应助”
4楼2014-08-14 17:31:20
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考拉003

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
coffee159: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢你,先准备重新转化试试看 2014-08-15 19:48:05
我们最近在做噬菌体相关的项目,按你说的,所感染的噬菌体为烈性噬菌体,那么取后的质粒,噬菌体是不可能感染的。
如果实验室有噬菌体,采用甲醛熏蒸的方法可以消灭掉的,找几个盆子放在实验室的各个地方,然后加入一些高锰酸钾,倒入甲醛溶液与高锰酸钾反应。把门窗什么的封闭了,最好关掉点烟型报警器。熏完后用氨水中和。
定期对实验室进行空间消毒。
不是微生物专业的却进入微生物行业
5楼2014-08-15 11:13:56
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coffee159

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 考拉003 at 2014-08-15 11:13:56
我们最近在做噬菌体相关的项目,按你说的,所感染的噬菌体为烈性噬菌体,那么取后的质粒,噬菌体是不可能感染的。
如果实验室有噬菌体,采用甲醛熏蒸的方法可以消灭掉的,找几个盆子放在实验室的各个地方,然后加入 ...

你好,请问一下如果菌体被噬菌体污染,提质粒的话会不会把噬菌体一起提出来?电泳时能看到噬菌体条带吗?谢谢了
6楼2014-08-15 22:02:59
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考拉003

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by coffee159 at 2014-08-15 22:02:59
你好,请问一下如果菌体被噬菌体污染,提质粒的话会不会把噬菌体一起提出来?电泳时能看到噬菌体条带吗?谢谢了...

这要看你感染的什么噬菌体,如果是烈性噬菌体,它只能裂解细胞,而不能把噬菌体遗传物质整合到细菌DNA里面;即使混合有烈性噬菌体的菌液,因为其DNA非常小,所以一般提质粒也不会提取到的(这个我个人觉得是,因为也没有做过相关实验);如果噬菌体是融源性的噬菌体,他的遗传物质会被整合到细菌基因组上,也不排除整合到质粒上的可能,那么提取的质粒也许会含有噬菌体的遗传物质。这个查查相关资料吧
不是微生物专业的却进入微生物行业
7楼2014-08-16 21:07:14
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coffee159

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 考拉003 at 2014-08-16 21:07:14
这要看你感染的什么噬菌体,如果是烈性噬菌体,它只能裂解细胞,而不能把噬菌体遗传物质整合到细菌DNA里面;即使混合有烈性噬菌体的菌液,因为其DNA非常小,所以一般提质粒也不会提取到的(这个我个人觉得是,因为 ...

非常感谢
8楼2014-08-17 14:57:00
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andylihuilai

新虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

二楼说的很对,顶一个吧
9楼2014-09-10 12:35:13
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