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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 纳米纤维上长的生物膜想用扫描电镜看一下生长情况怎么做预处理比较适合我的生物膜
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小壁虎丢尾吧

新虫 (初入文坛)

[求助] 纳米纤维上长的生物膜想用扫描电镜看一下生长情况怎么做预处理比较适合我的生物膜 已有1人参与

本人用纳米醋酸纤维膜作为载体，在上面培养了乳酸杆菌的生物膜，想用扫描电镜看一下生物膜生长情况， 但是不知道有些文章里说的预处理适不适用于我的生物膜，我该怎么对它做预处理，求助大神
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1楼 2014-08-13 15:09:39
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小壁虎丢尾吧

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by snoopytbw at 2014-08-14 09:20:31
有些经验哈，我以前做过矿物表面微生物附着情况的SEM，反正感觉用文献里面正儿八经的方法预处理，结果会发现菌都洗光了，或者有很多莫名其妙的白色残留。后来我资讯的SEM的专家，他们说如果是细菌样品的话，前处理越 ...

真的很谢谢啊我的那个是醋酸纤维膜，很脆弱，所以我只要做一个戊二醛固定再乙醇梯度洗脱后风干就行吗？

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3楼2014-08-15 21:50:18
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有些经验哈，我以前做过矿物表面微生物附着情况的SEM，反正感觉用文献里面正儿八经的方法预处理，结果会发现菌都洗光了，或者有很多莫名其妙的白色残留。后来我资讯的SEM的专家，他们说如果是细菌样品的话，前处理越少越好，因为细菌在伪真空环境下的形变相对于细胞来说很微弱。后来我就直接用甲醛或者戊二醛预固定15分钟，然后洗2遍直接风干或者二氧化碳临界点干燥，切勿用冷干。你试试看。后来我有次用酒精洗了一遍，直接风干了喷金上机发现效果更好。
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2楼2014-08-14 09:20:31
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小壁虎丢尾吧 at 2014-08-15 21:50:18
真的很谢谢啊我的那个是醋酸纤维膜，很脆弱，所以我只要做一个戊二醛固定再乙醇梯度洗脱后风干就行吗？
...

纤维膜啊。。。我觉得你可以先试试。做几个平行组，1，戊二醛固定，先0.25%预固定下，然后别洗直接喷金SEM。2，戊二醛2.5%固定个20分钟，也别洗直接SEM，3，按照常规方法，预固定，固定，洗脱后干燥上机。3个方法都试试，我的经验是越脆弱的样品，操作越少效果越好。。。。我的菌，酒精不能碰，一洗就掉。。。我是用乙酸乙酯固定完直接上机的。
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小壁虎丢尾吧
4楼2014-08-16 21:57:16
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小壁虎丢尾吧

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by snoopytbw at 2014-08-16 21:57:16
纤维膜啊。。。我觉得你可以先试试。做几个平行组，1，戊二醛固定，先0.25%预固定下，然后别洗直接喷金SEM。2，戊二醛2.5%固定个20分钟，也别洗直接SEM，3，按照常规方法，预固定，固定，洗脱后干燥上机。3个方法都 ...

嗯嗯太感谢了呀我会按照您说的方法试试的谢谢呀以后如果有什么问题在再在一起交流哈

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5楼2014-08-19 10:54:59
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