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zmj521good铁杆木虫 (小有名气)
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构建表达载体后要么检测不到目的基因，要么检测不到载体上的抗性基因
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各位大侠：最近，本人构建表达载体总是出问题。前提：空表达载体没有问题（已验证），自己构建的克隆载体也没有问题，已经测过序了。 将目的基因插入表达载体后转化的板上长了单克隆，但是，菌落、菌液、质粒PCR检测后，（1）有目的基因，但是没有载体上的抗性基因。（克隆载体和表达载体的抗性不同）；（2）有抗性基因，但是没有目的基因。（3）终于有抗性基因也有目的基因了，转化到农杆菌中后，菌落、菌液、质粒PCR检测不到目的基因，但是能检测到抗性基因以及载体上固定的一段。 实在不知道哪里出问题了，急求各位大侠帮忙分析一下，谢谢啊！ |
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