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天天向上160

铁杆木虫 (职业作家)

[交流] 获得细菌的转化子,但是质粒pDsRed不表达,如之奈何?

用热击法将质粒pDsRed转化进受体菌(无质粒),在抗性平板上长出转化子,但不表达,菌落没有变红,也不发荧光,请问如何解决?
请问pDsRed表达的条件是什么?用IPTG诱导,没有表达。

[ Last edited by 天天向上160 on 2008-4-11 at 12:45 ]
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我们寻求正义、和平、公正! 红十字会是个垃圾组织!!!
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mklpumc

木虫 (小有名气)

是不是挑到假阳性的克隆了,转化后的菌你培养后提过质粒,做过酶切鉴定吗?
2楼2008-04-10 21:09:16
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天天向上160

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
Originally posted by mklpumc at 2008-4-10 21:09:
是不是挑到假阳性的克隆了,转化后的菌你培养后提过质粒,做过酶切鉴定吗?

提过质粒,但没有做过酶切。
我们寻求正义、和平、公正! 红十字会是个垃圾组织!!!
3楼2008-04-11 12:46:49
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wwfifa

铜虫 (小有名气)

先单酶切一下,验证重组质粒片段大小,然后再作个pcr验证了
4楼2008-04-11 14:14:42
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