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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 敲除效果不明显，如何才能提高敲除效率，求虫友指点
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lintao111

新虫 (小有名气)

[求助] 敲除效果不明显，如何才能提高敲除效率，求虫友指点 已有1人参与

我最的RNA敲除效果只有50%，不太理想，用的试剂是RNAMAX，不知道哪位虫友这方面经验比较多，如何能提高效果，求指点
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1楼 2014-08-05 15:15:53
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该是合成的siRNA oligos，而不是vector－based吧。如果是这样，转染效率应该不是太大问题。我个人感觉主要是siRNA顺序的问题。不知道你是用单一的oligos还是几个合在一起。是你自己设计合成的还是参考文献合成的？抑或是从可靠公司直接ordered的？

knockdown 50％左右确实低了些，但有些实验可能也是可用的了。
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2楼2014-08-05 21:02:54
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lintao111

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-08-05 21:02:54
应该是合成的siRNA oligos，而不是vector－based吧。如果是这样，转染效率应该不是太大问题。我个人感觉主要是siRNA顺序的问题。不知道你是用单一的oligos还是几个合在一起。是你自己设计合成的还是参考文献合成的？ ...

是我 自己合成的 ，是单一的oligos，吉码公司合成的，不是打广告或者黑它，但是50%达不到理想效果，
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3楼2014-08-05 21:35:00
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader
引用回帖:
3楼: Originally posted by lintao111 at 2014-08-05 08:35:00
是我 自己合成的 ，是单一的oligos，吉码公司合成的，不是打广告或者黑它，但是50%达不到理想效果，...

可能还是与你选定的顺序有关。往往需要试几组才会找的更加理想的。
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4楼2014-08-05 21:40:52
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lintao111

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-08-05 21:40:52
可能还是与你选定的顺序有关。往往需要试几组才会找的更加理想的。...

嗯  谢谢。。
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5楼2014-08-05 22:01:24
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