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lintao111

新虫 (小有名气)

[求助] 敲除效果不明显,如何才能提高敲除效率,求虫友指点 已有1人参与

我最的RNA敲除效果只有50%,不太理想,用的试剂是RNAMAX,不知道哪位虫友这方面经验比较多,如何能提高效果,求指点
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

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【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该是合成的siRNA oligos,而不是vector-based吧。如果是这样,转染效率应该不是太大问题。我个人感觉主要是siRNA顺序的问题。不知道你是用单一的oligos还是几个合在一起。是你自己设计合成的还是参考文献合成的?抑或是从可靠公司直接ordered的?

knockdown 50%左右确实低了些,但有些实验可能也是可用的了。
2楼2014-08-05 21:02:54
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lintao111

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-08-05 21:02:54
应该是合成的siRNA oligos,而不是vector-based吧。如果是这样,转染效率应该不是太大问题。我个人感觉主要是siRNA顺序的问题。不知道你是用单一的oligos还是几个合在一起。是你自己设计合成的还是参考文献合成的? ...

是我 自己合成的 ,是单一的oligos,吉码公司合成的,不是打广告或者黑它,但是50%达不到理想效果,
3楼2014-08-05 21:35:00
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

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引用回帖:
3楼: Originally posted by lintao111 at 2014-08-05 08:35:00
是我 自己合成的 ,是单一的oligos,吉码公司合成的,不是打广告或者黑它,但是50%达不到理想效果,...

可能还是与你选定的顺序有关。往往需要试几组才会找的更加理想的。
4楼2014-08-05 21:40:52
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lintao111

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-08-05 21:40:52
可能还是与你选定的顺序有关。往往需要试几组才会找的更加理想的。...

嗯  谢谢。。
5楼2014-08-05 22:01:24
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