| 查看: 466 | 回复: 0 | ||
[求助]
求助：pCDNA3.1（+）在EPC细胞中能够表达吗？
|
|
求助：pCDNA3.1（+）在EPC细胞中能够表达吗？ 各位前辈，本人刚刚开始做真核质粒，想构建DNA疫苗，使用的载体是pCDNA3.1（+）， 酶切位点为Nhe I 和Xho I，前面加了Kozak 序列 F：CG（保护性碱基）GCTAGC（Nhe I酶切位点）ACAATGG（Kozak序列）TCCCGAAGAACATCAAGGA（目的基因含信号肽） R: CC（保护性碱基）CTCGAG（Xho I酶切位点）TTA（终止子）ATGATGATGATGATGGTG（6*His tag)TGAATGCTGCTTTTTGG(目的基因） 转染的四五次EPC细胞，提取mRNA，能够检测到目的条带，但是WB不管是24h或36h收集上清培养基或者细胞都检测不到？求各位指点！ |
回复此楼» 猜你喜欢
今年E04面上
已经有18人回复
-
2026年面上项目中了，2A+B, 会评顺利通过
已经有10人回复
-
大龄残疾硕士的一点执念
已经有16人回复
-
刑法学论文投稿求助
已经有5人回复
-
Journal of Environmental Chemical Engineering
已经有3人回复
-
最后一年，祈求好运
已经有3人回复
-
风电环氧领域
已经有3人回复
-
售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急
已经有4人回复
-
植酸TLC薄层色谱爬板
已经有6人回复
