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奋发-言午

银虫 (小有名气)

[求助] 流动相里不加TFA,有什么能 替代 它? 已有8人参与

HPLC分析  多肽或蛋白质  时,流动相里一般加0.1%的TFA,能不能换一种物质替代它?最好能使中性或者碱性的,
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chenzhengyi

木虫 (小有名气)

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奋发-言午: 金币+2 2014-08-04 16:58:44
TFA还是比较好的,能很好的解决拖尾问题,能用还是用吧。我用HPLC做过蛋白多肽,但是感觉没有意义的,文章难投,审稿人经常会问你那些峰是什么(除非你有标准蛋白)?
有阳光的地方就会有阴影
6楼2014-08-01 18:01:33
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shale1983

铁杆木虫 (正式写手)

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
可以的,不同的体系,0.1%的是TFA体系,你可以用PBS buffer  (这个用得比较多)  ,也可以用Tris 体系,这些都是弱碱性体系。
2楼2014-08-01 11:03:21
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

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奋发-言午: 金币+2, 用过甲酸,峰变形了 2014-08-04 16:57:41
甲酸可以考虑下噻
3楼2014-08-01 12:53:15
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cpuclz

木虫 (正式写手)

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奋发-言午: 金币+2, 具体在水相和乙腈相里加多少的乙酸铵呢? 2014-08-04 16:58:25
中性可以考虑乙酸铵,碱性加0.05%的氨水。
用碱性的话,要注意柱子填料的pH范围
4楼2014-08-01 14:25:39
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swallow13

禁虫 (正式写手)

★ ★
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奋发-言午: 金币+2 2014-08-04 16:58:36
本帖内容被屏蔽

5楼2014-08-01 17:31:57
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e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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奋发-言午: 金币+2 2014-08-04 16:58:50
tfa一般来说有离子对试剂的左右,对分析多肽蛋白比较好,基本通用。另外还有个左右就是对色谱柱封尾,而甲酸,醋酸没这种作用
悲催的研发!
7楼2014-08-03 09:39:23
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……

【答案】应助回帖

★ ★
奋发-言午: 金币+2 2014-08-04 16:58:58
试试甲酸或者磷酸了
人生若只如初见...
8楼2014-08-04 14:03:39
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奋发-言午

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by shale1983 at 2014-08-01 11:03:21
可以的,不同的体系,0.1%的是TFA体系,你可以用PBS buffer  (这个用得比较多)  ,也可以用Tris 体系,这些都是弱碱性体系。

不太明白啊,
能详细说一下吗,比如水和乙腈两个流动相里加多少PBS?
9楼2014-08-04 16:54:40
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

TFA的作用是双重的,一是调节PH,二是充当离子对试剂,如果要改变的话,好像有用过磷酸的。
10楼2014-08-04 21:15:00
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