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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 流动相里不加TFA，有什么能 替代 它？
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奋发-言午

银虫 (小有名气)

[求助] 流动相里不加TFA，有什么能 替代 它？ 已有8人参与

HPLC分析  多肽或蛋白质  时，流动相里一般加0.1%的TFA，能不能换一种物质替代它？最好能使中性或者碱性的，
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1楼 2014-08-01 10:00:43
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

chenzhengyi

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
奋发-言午: 金币+2 2014-08-04 16:58:44
TFA还是比较好的，能很好的解决拖尾问题，能用还是用吧。我用HPLC做过蛋白多肽，但是感觉没有意义的，文章难投，审稿人经常会问你那些峰是什么(除非你有标准蛋白)？
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有阳光的地方就会有阴影
6楼2014-08-01 18:01:33
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普通回帖

shale1983

铁杆木虫 (正式写手)
商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
可以的，不同的体系，0.1%的是TFA体系，你可以用PBS buffer  （这个用得比较多）  ，也可以用Tris 体系，这些都是弱碱性体系。
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2楼2014-08-01 11:03:21
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
奋发-言午: 金币+2, 用过甲酸，峰变形了 2014-08-04 16:57:41
甲酸可以考虑下噻
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3楼2014-08-01 12:53:15
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cpuclz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
奋发-言午: 金币+2, 具体在水相和乙腈相里加多少的乙酸铵呢？ 2014-08-04 16:58:25
中性可以考虑乙酸铵，碱性加0.05%的氨水。
用碱性的话，要注意柱子填料的pH范围
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4楼2014-08-01 14:25:39
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swallow13

禁虫 (正式写手)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
奋发-言午: 金币+2 2014-08-04 16:58:36
本帖内容被屏蔽
5楼2014-08-01 17:31:57
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e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
奋发-言午: 金币+2 2014-08-04 16:58:50
tfa一般来说有离子对试剂的左右，对分析多肽蛋白比较好，基本通用。另外还有个左右就是对色谱柱封尾，而甲酸，醋酸没这种作用
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悲催的研发！
7楼2014-08-03 09:39:23
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……

【答案】应助回帖

★ ★
奋发-言午: 金币+2 2014-08-04 16:58:58
试试甲酸或者磷酸了
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人生若只如初见...
8楼2014-08-04 14:03:39
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奋发-言午

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by shale1983 at 2014-08-01 11:03:21
可以的，不同的体系，0.1%的是TFA体系，你可以用PBS buffer  （这个用得比较多）  ，也可以用Tris 体系，这些都是弱碱性体系。

不太明白啊，
能详细说一下吗，比如水和乙腈两个流动相里加多少PBS？
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9楼2014-08-04 16:54:40
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

TFA的作用是双重的，一是调节PH，二是充当离子对试剂，如果要改变的话，好像有用过磷酸的。
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10楼2014-08-04 21:15:00
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