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土壤脱氢酶活性测定时,土样中加TTC还是Tris-HCl缓冲液,还是什么?急! 已有1人参与
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土壤脱氢酶活性测定 原理 。。。 测定步骤 1 称取4克鲜土于50ml三角瓶中,加入4mL(TTC-葡萄糖-Tris缓冲溶液(pH7.6,即2ml 1%TTC-Tris缓冲溶液,2ml 1%葡萄糖),置37℃暗室培养24hr。 2 取出后用少量甲醇提取后过滤,再用50ml容量瓶或比色管定容。 3 滤液马上用485nm波长下分光光度计测定。 附:pH7.6 Tris缓冲液的配制: A:0.2M 三-(羟甲基)-氨基甲烷溶液(1000 ml含24.23克) B:0.2M HCl 100 ml A+76.8ml B,加水稀释至400 ml,准确调节pH为7.6。 参考文献 Casida LC Jr, Klein DA, Santoro T(1964) Soil dehydrogenase activity. Soil Science 98, 371-376. H.Y.Chu, J.G.Zhu, Z.B.Xie, H.Y.Zhang, Z.H.Cao and Z.G.Li(2003) Effects of lanthanum on dehydrogenase activity and carbon dioxide evolution in a Haplic Acrisol. Australian Journal of Soil Research 41, 731-739. H.Y.Chu, 上述方法中提到 加入4mL(TTC-葡萄糖-Tris缓冲溶液(pH7.6,即2ml 1%TTC-Tris缓冲溶液,2ml 1%葡萄糖),TTC是一种溶液,Tris-HCl是一种缓冲溶液,请问各位"1%TTC-Tris缓冲溶液"怎么配?有的资料里写只加1%TTC和蒸馏水,到底应该加什么呢?谁有更具体的方法或其他方法?多谢! |
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