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renzaigele

铜虫 (小有名气)

[求助] DEAE Sepharose Fast Flow 纯化问题 已有1人参与

以前没用过 DEAE Sepharose Fast Flow 纯化。  想问问 用0、 0. 1、 0. 3、 0. 5、 0. 7、 1. 0 mmol / L氯化钠进行梯度离心洗脱的时候, 每一个浓度用多大体积啊, 都是一个柱体积吗?  
再就是怎么收集啊? 是不是用每浓度的氯化钠都分别冲一个柱体积, 监测一下紫外图,看看吸收峰。
然后再重复一次,在重复的时候,在固定时间收集有吸收峰的那部分洗脱液进行活性测定????

谢谢哦
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870609

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
通常的做法是要拉一个梯度吧,看一下你的目标产物在什么时候可以洗脱下来,后续才用分段洗脱的吧
2楼2014-08-01 10:43:11
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