24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 286  |  回复: 11
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

bijiaoyingyang

金虫 (小有名气)

[交流] 求助提质粒

我这几天转化的大肠杆菌TOP10 提质粒3次,摇的菌液达到28小时了,但是浓度始终不大,不浓稠,LB培养液比较清。提取的质粒电泳时,有时有极微弱的条带,更多时候什么也没有,实在不知道该怎么办? 各位大侠帮帮忙!
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
看看有没有噬菌体污染,还有分子克隆上有一些提高拷贝数的方法。菌液一直不浑浊很可能是污染了噬菌体。铺个空斑看看。
For my life!
5楼2008-04-08 14:17:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

游侠892

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
是不是你的LB培养基不是新配的啊?或是你在培养时未加菌株抗性的抗生素造成ti质粒丢失了啊?
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索
2楼2008-04-08 10:05:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bijiaoyingyang

金虫 (小有名气)

培养时,已经加菌株抗性的抗生素了。并且已经进行了PCR检测,结果有目的条带出现。把PCR时用的模板10微升加到25毫升新鲜LB中,37度,250RPM培养28小时后的结果还是菌液不很混浊。
     用上述菌液提取质粒,没有提到。是不是菌液不浓稠,就会影响质粒的提取呢?

     请教了!
3楼2008-04-08 13:33:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

傻子

木虫 (正式写手)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):搂主还有问题,你在费心一下.
是什么质粒?低拷贝的质粒,可能浓度就是不高的,多提几管再浓缩。可以加200微升菌液到25毫升LB中,提高抗生素浓度再试试
1984年中国制造,长173CM,净重64kg,采用人工智能,国家免检优质产品。
4楼2008-04-08 13:43:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿:西北大学,英一数一408-284分求调剂 +4 12.27 2026-03-27 4/200 2026-03-29 14:40 by zhshch
[考研] 309求调剂 +7 谁不是少年 2026-03-29 7/350 2026-03-29 13:17 by mumin1990
[考研] 070300化学354求调剂 +6 101次希望 2026-03-28 6/300 2026-03-29 12:57 by 无际的草原
[考研] 086000生物与医药调剂 +5 Feisty。 2026-03-28 9/450 2026-03-29 12:02 by longlotian
[考研] 295求调剂 +4 wei-5 2026-03-26 4/200 2026-03-28 23:20 by 小木虫tim
[考研] 083000学硕274求调剂 +8 Li李鱼 2026-03-26 8/400 2026-03-28 20:33 by 加油向未来啊
[考研] 085602 化工专硕 338分 求调剂 +12 路痴小琪 2026-03-27 12/600 2026-03-28 15:41 by L135790
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-27 6/300 2026-03-28 14:10 by 唐沐儿
[考研] 085600 286分 材料求调剂 +7 麻辣鱿鱼 2026-03-27 8/400 2026-03-28 12:17 by zllcz
[材料工程] 一志愿C9材料与化工专业总分300求调剂 +8 曼111 2026-03-24 9/450 2026-03-28 07:58 by YYYYX1234
[考研] 291求调剂 +6 HanBeiNingZC 2026-03-24 6/300 2026-03-28 07:55 by baoball
[考研] 一志愿211院校 344分 东北农业大学生物学学硕,求调剂 +5 丶风雪夜归人丶 2026-03-26 8/400 2026-03-27 19:22 by 丶风雪夜归人丶
[考研] 266求调剂 +11 阳阳哇塞 2026-03-27 12/600 2026-03-27 17:56 by yu221
[考研] 材料292调剂 +12 橘颂思美人 2026-03-23 12/600 2026-03-27 15:44 by caszguilin
[论文投稿] Journal of Mechanical Science and Technology +3 Russ_ss 2026-03-25 5/250 2026-03-27 10:49 by 陆小果画大饼
[考研] 333求调剂 +6 wfh030413@ 2026-03-23 6/300 2026-03-26 22:45 by 学员8dgXkO
[考研] 中国科学院深圳先进技术研究院-光纤传感课题组招生-中国科学院大学、深圳理工大学联培 +5 YangTyu1 2026-03-26 5/250 2026-03-26 18:27 by 猫咪猫咪呀
[考研] 289求调剂 +17 硕星赴 2026-03-23 17/850 2026-03-26 16:18 by 不吃魚的貓
[考研] 求调剂 +6 研研,接电话 2026-03-24 7/350 2026-03-24 17:01 by barlinike
[考研] 石河子大学(211、双一流)硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
信息提示
请填处理意见