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cc包啊

银虫 (小有名气)

[求助] 肝S9 已有1人参与

1.用什么匀浆?有看到用0.15Mkcl的,有看到用tris-hcl缓冲液的,还有0.1M磷酸盐缓冲液的?请问到底该用什么?可以用0.25M的蔗糖吗?因为前面制过微粒体,匀浆用的就是0.25M蔗糖。哪种匀浆介质利于保存?
2.该怎么保存?我看到说“液氮速冻后-80℃保存”,意思就是先扔进液氮,再拿出来放-80℃冰箱?放液氮要放多久时间才能拿出来呢?
3.肝S9的温孵体系一般多少体积?加多少S9?是不是和微粒体温孵差不多,除了把微粒体换成s9?

新手,求解。再不做实验,我就要被老板教育了/(ㄒoㄒ)/~~ 可是盲目做失败了浪费样品,太虐。跪求解答
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cc包啊

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by giksgdjbkj at 2014-07-29 10:37:02
许多前致突变剂、致癌剂的生物转化是依赖细胞内微粒体混合功能氧化酶系来完成的,S9是大鼠肝匀浆经 9000 ×g低温离心得到的上清液,其主要有效成分为混合功能氧化酶(mixed function oxidase , MPO) 系统,具有活化氧 ...

因为是疾病模型的样品,所以买不到/(ㄒoㄒ)/~~ 只能自己制备
3楼2014-07-29 10:50:34
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giksgdjbkj

新虫 (初入文坛)


许多前致突变剂、致癌剂的生物转化是依赖细胞内微粒体混合功能氧化酶系来完成的,S9是大鼠肝匀浆经 9000 ×g低温离心得到的上清液,其主要有效成分为混合功能氧化酶(mixed function oxidase , MPO) 系统,具有活化氧分子和与底物结合的双重功能,是许多体外实验常用的体外代谢活化系统。目前制备大鼠肝S9 (Hepatic post-mitochondrial supernatant)常用的诱导剂多氯联苯(Polychlorinated biphenyls , PCBs)主要是四、五、六氯联苯的混合物,能诱导产生许多前致突变剂、致癌性化学物生物转化所需要的细胞色素酶。
以上是转载的,但是可能买的话,节省很多时间和人工成本
2楼2014-07-29 10:37:02
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A奇点

新虫 (小有名气)

您好,我想问您一下,您在做温孵时候的转速是多少啊?

发自小木虫Android客户端
4楼2019-04-03 12:41:26
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5楼2021-04-26 16:13:03
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