| 查看: 536 | 回复: 1 | ||
[求助]
重组蛋白分离纯化 已有1人参与
|
| 我的重组蛋白带有GST标签，第一次做纯化的时候很顺利的得到了目的蛋白，但是在做第二遍的时候加了2-巯基乙醇，蛋白是挂在柱子上了，但是又洗不下来了，增大GSH的浓度也不起作用，两次不同之处是：第一次做的时候破碎以及平衡洗脱缓冲液用的都是pbs，第二次做的时候破碎用的pbs+2-巯基乙醇，平衡液与破碎液一样，洗杂及洗脱液用的是50mM Tris-HCl，150mM NaCl，2mM DTT。我想问下2-巯基乙醇和DTT对GST柱子的洗脱有影响吗？哪位大侠知道这是什么原因？2-巯基乙醇和DTT使用的浓度范围是多少？谢谢啦 |
回复此楼» 猜你喜欢
本科211，293分请求调剂
已经有4人回复
-
求调剂
已经有3人回复
-
085400电子信息319求调剂（接受跨专业调剂）
已经有5人回复
-
268求调剂
已经有9人回复
-
一志愿双非085502，267分，过四级求调剂
已经有3人回复
-
一志愿085404，总分291，四级已过，求调剂
已经有4人回复
-
297求调剂
已经有12人回复
-
26调剂 086003
已经有3人回复
-
265求调剂
已经有20人回复
-
271分求调剂学校
已经有11人回复
protein780
铁虫 (小有名气)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 184.4
- 散金: 2
- 红花: 2
- 帖子: 135
- 在线: 61.1小时
- 虫号: 2024196
- 注册: 2012-09-23
- 专业: 蛋白质组学
2楼2014-07-31 11:10:46
