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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 原核表达的条带问题
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skkyy88888

铜虫 (著名写手)

[交流] 原核表达的条带问题

原核表达的条带问题


大家好，我最近做了个关于原核表达的实验，经过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，表达出来的条带并不是单一的条带，而是弥散到整个电泳条带中，而未经诱导的大肠杆菌条带却比较专一，请问这是什么原因呢？怎么改进？或者我的条带就根本没表达出来呢？  

图片中１为未诱导条带，２．３．４为诱导１．２．３小时条带．请大家帮忙分析下．谢谢

[ Last edited by skkyy88888 on 2008-4-7 at 10:22 ]
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1楼 2008-04-07 10:15:55
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skkyy88888

铜虫 (著名写手)
谷峰(金币+0,VIP+0):你可以放到附件里传上来！！！
怎么上传图片哦？我有张表达的图片想让大家看下．
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2楼2008-04-07 10:18:01
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jfllfj

金虫 (小有名气)
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
既然已经做了原核表达，你应该清楚你的蛋白的分子量有多大了吧，存在亚基吗？
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3楼2008-04-07 10:51:11
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xxh8372

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫微笑研究僧
reasonspare(金币+0,VIP+0):搂主还有问题,你在费心一下.
可是看不到你的图哦   

快点把图贴上来吧
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____/\~~~/\,----(..)/\____//|(\|(^\/___\/\||__||__|-"
4楼2008-04-07 10:57:42
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long0553299

都看不到图,晕
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5楼2008-04-07 14:11:51
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skkyy88888

铜虫 (著名写手)
我把图弄上来了
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6楼2008-04-08 12:23:40
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skkyy88888

铜虫 (著名写手)
大家帮忙分析下吧，我是用３７度诱导的，今天试了个２０度还是没的
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7楼2008-04-08 12:24:12
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轻5飞扬

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
reasonspare(金币+4,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
感觉没有诱导出来呀,那些所谓的弥散应该是你后面的上样量比诱导前的大,如果诱导出来的话应该是有一个非常特异带的

[ Last edited by 轻5飞扬 on 2008-4-8 at 18:09 ]
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8楼2008-04-08 18:06:53
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轻5飞扬

金虫 (正式写手)
跑的相当难看,呵呵,为了检测下
分别为诱导前,诱导后,上清,沉淀(前四道)
在沉淀,比较郁闷噻

[ Last edited by 轻5飞扬 on 2008-4-8 at 18:11 ]
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9楼2008-04-08 18:10:31
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winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
IPTG的诱导效应在前3个小时表现不出来吧，我的经验一般在4个小时以后，5、6小时的效果很明显，一般情况下都是在18-28度的条件下诱导6个小时以上。
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For my life！
10楼2008-04-08 19:25:48
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