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liugsl_

铜虫 (初入文坛)

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[交流] 细菌生长曲线的获得

唉呀，以下是本人的这几天的工作就是细菌的生长曲线的绘制，但是会出来的结果不好啊，液体培养基（牛肉膏蛋白胨）利用紫外可见分光光度计测量bacteria suspension的 OD值，绘制细菌的吸光度随时间的生长曲线。微生物这方面的只是很欠缺做之前不知道吸光度和OD的关系后来才发现OD值也就是Opitcal density在600nm(细菌基本上是这附近)的吸光度可以粗略反映细菌的浓度，吸光度Abs=-log10（T）=OD；因为不是很熟悉所以自己摸索了个几天，以下是相关growth curve：目前的问题是没有做出比较理想的G-C图，目前还打算结合平板计数确定CFU/ml，平稳期的时候 OD值>0.4后，一次稀释达不到0.4一下就会产生各种问题导致散点不是很好；有时候比较困会漏掉采样点使精度下降，还有一个问题就是我做三个parallel 实验，一个空白对照（未接种的培养基），随着时间的延长空白值越来越大，有时菌悬液的OD值还没空白值大，实验空白对照也要把握好，大家有没有什么建议或好的方法，特别是做微生物的前辈给点建议呗，唉好累啊，洗洗好好休息一下。

做的一些图

估计是由于自己操作问题加上半夜比较困.....

最开始做的一次没有调整期和稳定期

Origin拟合一下由于稳定期和衰亡期数据不好，可以发现拟合的并不好

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宁静简约祥和

1楼2014-07-25 20:10:06

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fayfeifei

铁杆木虫 (著名写手)

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专业: 环境污染化学

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

楼主说得好混乱…… 估计还是没睡好吧……

我的建议是：
1 做实验之前做好一切准备，包括睡好觉，实验过程中不要出现因为犯困而犯的错误之类的；
2 你提到空白的OD值有时候都会超过菌液，一种可能是细菌生长少，因此跟空白的差异不明显，另一种可能是……楼主你并没有提到你的培养基是不是灭过菌的，接种是不是在完全洁净无菌的空间内做的……；
3 数据上有小量波动是正常的，尤其是如果你取点很密的话；
4 注意稀释倍数，如果没有稀释到合理的范围内，或者因为稀释不注，会导致数据差异巨大；
5 或许，换一个生长曲线公式吧……

我没有具体做过生长曲线，仅能从自己的经验上给出以上参考了～