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study236

银虫 (小有名气)

[交流] 向大侠们请教几个关于反向-PCR 的问题

1.RT-PCR与普通的PCR的反应体系及流程有何主要区别?
2.常用于RT-PCR的两种逆转录酶在性能和效率方面有何区别?在实验方案的设计上有什么要注意的地方?
常用的两种逆转录酶是AMV(禽类成髓细胞瘤病毒)和MMLV(莫落尼式白血病病毒)
3.如何根据你设计的实验方案选择合适的RT-PCR引物?
用基因特异性引物进行转录、用oligo(dt)引物、用随机引物。
4.在RNA提取过程中。如何避免多糖和RNA 共沉淀?共沉淀的多糖对反向PCR有什么影响?
谢谢大侠们帮忙!1
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