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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » CTAB法提DNA，沉淀DNA有漂亮的絮状物，提取完电泳却什么都没有，大家来帮帮忙
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wuweifeng710

木虫 (正式写手)
引用回帖:
18楼: Originally posted by biotech_zhou at 2014-07-25 10:30:07
你自己把它弄没了，我们也是直接将絮状物挑出来。

挑出来了，你们怎么处理啊
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21楼2014-07-25 11:00:55
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njtx888

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
19楼: Originally posted by wuweifeng710 at 2014-07-25 10:59:18
裂解液里面氯化钠是1.4M...

提的是植物细胞吧，细胞壁难破碎和多糖是两大特点，有CTAB在低温容易结晶凝固，建议提高钠离子浓度至1.8M，增加65度温浴一小时的步骤（期间漩涡剧烈震荡三次，每次三分钟），使DNA充分溶出，后来用预冷的异丙醇常温静置，不要低温静置，否则又有絮状出现
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22楼2014-07-25 16:31:16
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双木大四叉

新虫 (初入文坛)
楼主啊，我也是这个问题啊，请问您是怎么解决的最终
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23楼2015-08-08 00:45:58
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qiyaocheng

木虫 (小有名气)

老虫

【答案】应助回帖

一般不管乙醇还是异丙醇的沉降都过夜沉降试试。每次冲洗后都离心，倒去清洗的乙醇。试试看吧
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毕业回望科研路，满目疮痍一身土
24楼2015-08-17 06:50:58
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blowriver

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
24楼: Originally posted by qiyaocheng at 2015-08-17 06:50:58
一般不管乙醇还是异丙醇的沉降都过夜沉降试试。每次冲洗后都离心，倒去清洗的乙醇。试试看吧

你说的沉降都需过夜是为了让其充分沉淀么？需要控制温度么？
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25楼2015-08-18 11:19:37
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blowriver

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
22楼: Originally posted by njtx888 at 2014-07-25 16:31:16
提的是植物细胞吧，细胞壁难破碎和多糖是两大特点，有CTAB在低温容易结晶凝固，建议提高钠离子浓度至1.8M，增加65度温浴一小时的步骤（期间漩涡剧烈震荡三次，每次三分钟），使DNA充分溶出，后来用预冷的异丙醇常温 ...

你好，我想问下为甚么预冷的异丙醇要常温静置呢？不是一般都是-20℃静置的么？你说否则又有絮状沉淀出现这个我不太理解，这一步不就是需要絮状沉淀么？  我的方法是参考这篇文献的：李金璐,王硕,于婧,王玲,周世良. 一种改良的植物DNA提取方法[J]. 植物学报,2013,01:72-78.
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26楼2015-08-18 11:22:52
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李杰华

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by stone2239 at 2014-07-22 20:58:32
如果有漂亮的絮状物，直接用牙签挑出，70%乙醇洗一次，离心，风干，充分溶解，测浓度+电泳，再试试。

为什么我提的不能成絮状物，求解答，但是浓度和质量后来检测没问题

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27楼2017-04-08 20:36:06
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