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最近很头疼一个蛋白。包涵体表达。变性后直接镍柱纯化再稀释复性。复性液中含有2M脲。复性一切正常,没有出现沉淀。电泳条带也很清楚,但是在我将复性后的蛋白浓缩,使用ph8.0 PBS透析后放置4度过夜(添加了甘油,终浓度40%)。第二天电泳鉴定,发现电泳跑出来的条带位置变小了,而且条带不清楚,很模糊,MARKER没有问题。难道是2M脲有助于保护蛋白不降解,比甘油的保护作用还强?
附件图片A是PBS透析后蛋白样电泳图,明显比B图复性后的蛋白电泳位置小,而且模糊
![蛋白质降解]()
A.jpg
![蛋白质降解-1]()
B.jpg |
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