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ysdxdm

木虫 (小有名气)

[求助] 包涵体复性 已有3人参与

最近在做包涵体的复性实验,想问问各位有没有好的试剂盒推荐或是好的方法,谢谢了。
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shenhongchen

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
试试稀释复性,也可以试试用色谱柱
2楼2014-07-16 21:19:24
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这两天连续开会和写报告,今天又是11点回到家,太累了,该日子具体讨论吧,贴篇文献,楼主先参考一下吧。

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  • 附件 1 : Invitroproteinrefoldingbychromatographicprocedures(2004).pdf
  • 2014-07-17 00:02:12, 234.34 K
3楼2014-07-16 23:55:41
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ehzhang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
以下几个条件有助于包涵体复性
1.在碱性条件下,如pH 8.0-9.0
2.复性buffer中加入一些促凝剂,如 glycerol, Arg, Urea,triton-100
3.蛋白浓度在 100 mg/ml左右
4.如蛋白中含有二硫键,加入氧化还原系统,如 GSH/GSSG
4楼2014-07-17 09:03:33
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ysdxdm

木虫 (小有名气)

谢谢各位的热情帮助
5楼2014-07-22 11:54:30
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jing井妮

银虫 (小有名气)

楼主的蛋白复性做完了吗?我最近刚开始做,有几个问题想请教一下。
6楼2014-09-25 08:57:58
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ysdxdm

木虫 (小有名气)

我用的TAKARA的复性试剂盒做的,效果还可以。
7楼2014-10-01 10:37:56
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