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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 工艺研究 » 凝血八因子稳定剂条件
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xzgood8888

铁虫 (小有名气)

[交流] 凝血八因子稳定剂条件 已有1人参与

现正在开发层析法纯化八因子，洗脱液是澄清的，但冻干之后再复溶就会有许多絮状物，这是什么原因呢？应该加入什么保护剂稳定剂吗？现在洗脱液里有甘氨酸和氯化钙，请问还有什么有效的方法可以解决这个问题呢？
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自己好好的!
1楼 2014-07-16 13:45:55
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roweahioh

新虫 (小有名气)
★ ★
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xzgood8888(星海慧儿代发): 金币+1, 多谢回帖交流 2014-07-30 17:07:48
絮状物会不会是盐影响之下析出的蛋白质？
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2楼2014-07-16 13:52:24
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xzgood8888

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by roweahioh at 2014-07-16 13:52:24
絮状物会不会是盐影响之下析出的蛋白质？

确实盐浓度降低会观察到絮状物减少，但由于量太少没法超滤，有没有什么办法可以减少盐的影响呢？
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自己好好的!
3楼2014-07-16 14:09:37
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anruoka

木虫 (正式写手)
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xzgood8888(星海慧儿代发): 金币+1, 多谢回帖交流 2014-07-30 17:07:57
引用回帖:
3楼: Originally posted by xzgood8888 at 2014-07-16 14:09:37
确实盐浓度降低会观察到絮状物减少，但由于量太少没法超滤，有没有什么办法可以减少盐的影响呢？...

赛多利斯和miliore都有微量超超滤管。
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我是一只好虫子
4楼2014-07-20 08:41:13
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werohthtw

新虫 (小有名气)
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xzgood8888(星海慧儿代发): 金币+1, 多谢回帖交流 2014-07-30 17:08:24
肯定是盐浓度导致蛋白质析出，先别超滤，想办法搞得不要析出
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5楼2014-07-21 11:16:07
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牛丫儿

新虫 (小有名气)
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xzgood8888(星海慧儿代发): 金币+1, 多谢回帖交流 2014-07-30 17:10:05
洗脱液是澄清的，说明没有发生盐析作用吧，是不是有其他因素导致八因子被激活？
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难学能学，天道酬勤
6楼2014-07-22 08:43:17
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xzgood8888

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 牛丫儿 at 2014-07-22 08:43:17
洗脱液是澄清的，说明没有发生盐析作用吧，是不是有其他因素导致八因子被激活？

冻干后再测FVIII活性没有显著降低，请问八因子被激活的话活性会有大幅变化吗？现在有点弄不清楚析出物是什么...请教高手~~
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自己好好的!
7楼2014-07-28 14:28:13
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giksgdjbkj

新虫 (初入文坛)
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xzgood8888(星海慧儿代发): 金币+1, 多谢回帖交流 2014-07-30 17:10:11
这析出的原因得好好研究，个人认为应该是盐析问题。但是活性没降低倒是比较奇怪
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8楼2014-07-29 10:22:46
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shenrxych

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你的纯化条件不是很好，导致洗脱后的VIII纯度不高，里面含有某些酶原，这些酶原如II,VII,IX,XI等等，这些酶原在有钙离子的条件下，被激活成有活性的酶，这些酶进一步激活纤维蛋白原，就变成纤维蛋白，出现絮状物。
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9楼2014-08-11 10:54:18
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