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分子信标荧光定量PCR问题求助
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我做了好几次分子信标的荧光定量PCR都没有得到所应得到的理想的标准曲线,甚至没有扩增迹象,但我的扩增的体系也是按目前的体系配的,我的目前的体系是 初浓度 终浓度 用量(总50) ul PCR 缓冲液 10* 1* 5 4*dNTP 2mM 每种0.2mM 5 引物1 0.5uM 10uM 2.5 引物2 0.5uM 10uM 2.5 Taq酶 1U/ul 1U/50ul 1 Mgcl2 25mM 2.0 mM 4 分子信标探针 0.5uM 10uM 2.5 模板DNA 5 高纯水 22.5 反应参数:94度 4分钟 94度10秒,60度30秒,72度20秒,40循环 72度3分钟 请教各路高手帮忙找找原因. [search]分子信标荧光定量PCR[/search] |
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