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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 请教关于柱前衍生
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zhangweihong

木虫 (著名写手)

[交流] 请教关于柱前衍生

请问各位同仁：我测氨基酸能用柱前衍生试剂代替柱后衍生试剂是用吗？谢谢！
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1楼 2008-04-02 09:19:53
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zxarraxz

至尊木虫 (职业作家)
★ ★
dnp(金币+2,VIP+0):谢谢应助……^_^
很多氨基酸都没有发色团,我一般在做夜相分离的时候都采用柱前衍生.
通常是使用苯甲酰氯或苄溴在碱性体系中和氨基酸的氨基反应,在氨基上加上一个带苯环的发色团. 这样紫外检测器就可以检测到信号了,而且这样还可以降低氨基酸的极性. 但是在做氨基酸手性分离的时候, 碱性体系会导致其消旋,所以一般是用半光氨酸的衍生方法.
在气相中一般多用三氟乙酸酐的衍生方法, 三氟乙酸的羧基会和氨基相连,将其变的更易挥发, 在cyclodex等手性柱上也有较好分离.
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探索未来
4楼2008-04-02 21:38:12
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luckymin

银虫 (小有名气)
不知你为什么要这样衍生
原则上来说衍生是为了更好的分离效果或是更高的检测灵敏度
如果你柱后衍生可以满足你的要求而又不会对分离和检测造成很大影响就没问题
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2楼2008-04-02 17:13:11
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retyty

金虫 (小有名气)
★ ★
dnp(金币+2,VIP+0):谢谢你的拙见，很好，继续关注分析……^_^
柱前衍生一般较容易处理，即是先将氨基酸衍生成易于分离和检测的物质，这就要求衍生化试剂对测定的干扰较小或可以掩蔽。
而柱后衍生是在没有合适的分离衍生物条件时，只好先将氨基酸分离后再衍生以便检测，柱后衍生对色谱柱分离要求没有柱前衍生那么苛刻，但是操作就相对复杂些，需要特定的仪器如柱后衍生仪与色谱仪连接。
如果楼主能在已有的色谱柱上分离氨基酸衍生物，最好就采用柱前衍生！
（以上只是鄙人的一些拙见，仅供参考！）
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3楼2008-04-02 18:13:17
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