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xjxlovelxl

荣誉版主 (知名作家)

CA-FANS

[求助] 关于MTT

请高手指点!

                                                           
最近在做MTT实验检测药物对细胞的生长抑制作用
1.以4000-5000/孔细胞种板,贴壁后吸掉培养基,换用不同浓度梯度的药物处理72h;
2.培养终止前的4h加入5mg/mlMTT20ul
3.4h后小心吸弃上清,加入DMSO150ul,振荡后测OD值
(实验以0.1%DMSO为溶剂对照;只加培养基不加细胞的孔为空白对照)
  
测出的OD值范围在0-1.5,这样的值是否可信?
因为算出的抑制率不高,低于50%,挺怀疑这个结果,因为国外文献报道是有效的啊


[ Last edited by xjxlovelxl on 2008-4-1 at 21:22 ]

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shuibinglao

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★
xjxlovelxl(金币+5,VIP+0):谢谢您~~
建议:
优化溶解药物的溶剂,
药物浓度是否偏低?
个人感觉OD值大于0.05或0.1以上(对照一般低于此数)?
细胞数量是否达到所需数量?

在这里大家互相帮助在这里我们一起成长在这里我们学到很多
3楼2008-04-02 13:23:05
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喀什巴旦杏

银虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
xjxlovelxl(金币+5,VIP+0):谢谢,现在还在摸索中前进!~~
OD值在0~2之间,正常。
抑制率低于50%,说明还有希望,再看看多个文献优化一下试验条件。

[ Last edited by 喀什巴旦杏 on 2008-4-2 at 10:55 ]
2楼2008-04-02 09:05:49
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