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烟曲霉基因敲除
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kwwl
铁虫
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[交流]
烟曲霉基因敲除
已有4人参与
各位大虾,露珠我呢现正打算做烟曲霉基因敲除的课题,大致方法思路如图:
一般说来引入目的基因500 bp的侧翼序列可以进行同源重组,1000bp效果更好些。但露珠现在所要研究的基因的3’端侧翼序列大概为300bp(按3’端最后一个外显子的终止密码子与下一个基因的超始密码子之间的碱基数算)。为保证基因敲除的效率,3’端的同源臂该怎么办呢?是继续往下面扩增还是扩增一段目的基因3’端的序列?若说得有什么不对的地方,请各位大虾拍砖。
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1楼
2014-07-10 12:04:32
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bio_sci
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专业: 病原细菌与放线菌生物学
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真菌难度不小啊,我建议你去咨询一个老师,他国外回来,专做这个的
[ 发自小木虫客户端 ]
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5楼
2014-08-08 13:09:34
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yipan
铜虫
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专业: 整合生物学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主用什么方法去敲哪?CAS-9还是TALENs?准备用什么试剂盒哪/T7E1还是NEB?
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2楼
2014-07-10 17:22:13
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kwwl
铁虫
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3楼
2014-07-11 10:46:29
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人于两点
铜虫
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专业: 抗感染药物药理
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这图是不是楼主要构建的质粒啊?!
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4楼
2014-08-08 12:23:08
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