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沧海蝴蝶

[交流] 紫外吸收法测DNA浓度问题

参考实验书上的操作:用紫外吸收法测DNA浓度时,“要将DNA样品作适当稀释,配制成5~50μg/ml的溶液“,请问怎么配制,本来浓度不就是未知的吗,还有用什么稀释?我测DNA浓度的目的是做部分酶切时好定量,我看好多人做酶切时都不测样品浓度,大概估计一下就行了,不知道虫友们有没有是碰到类似的问题,恳求大家的帮助。谢谢!
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elvias

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
sxdxrhyy(金币+2,VIP+0):xiexie
可以不用测,一般可以和marker的主带浓度比较,得出一个大致的浓度就可以。
比如takara的marker一般每微升是10纳克的核酸量,比较亮度就可以得出大致的量。
如果要测得话,根据你沉淀的核酸的量,进行稀释,一般稀释为120倍。
2楼2008-03-31 22:26:57
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lauren180

木虫 (著名写手)

小木虫挖井人

知道OD值、知道核酸分子大小,可以计算核酸的浓度。
细推物理须行乐。
3楼2008-04-01 09:00:25
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叶子1983

铜虫 (小有名气)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
测出260nm出的吸收值,有一个公式可以带入计算的,好像是稀释倍数x260nm吸收值/6600,你去查一下,稀释倍数是一开始原始溶液稀释多少倍配成你要侧吸收值的那个溶液
4楼2008-04-01 09:38:45
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轻5飞扬

金虫 (正式写手)

上定量Marker就可以知道了啊
5楼2008-04-01 15:30:04
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