应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 如果我要检测一个转录因子由于刺激而诱导性表达，刺激多长时间可以用western检测出来
51/1返回列表
查看: 1216  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

lmc2537

铜虫 (小有名气)

[交流] 如果我要检测一个转录因子由于刺激而诱导性表达，刺激多长时间可以用western检测出来

谢谢大家！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-07-06 18:14:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

72度冰

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
lmc2537: 金币+2 2014-07-07 16:23:27
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-07-07 19:02:18
一般情况下，建议楼主是做一个时间梯度的，常见的也是最保险的：0，2,4,6,12,24h, 或者 0,4,8,16,24h  各种转录因子的活化时间也不是十分固定，看是哪个通路的，不过一般而已，2h左右就可以检测到，既然是刺激入核，在之后的一段时间直到24h左右应该都可以检测到，有些情况24h之后会回复到正常水平。
赞一下 回复此楼
吾非予苍生，乃为汝，魁于天下。
2楼2014-07-07 16:16:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lmc2537

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 72度冰 at 2014-07-07 16:16:57
一般情况下，建议楼主是做一个时间梯度的，常见的也是最保险的：0，2,4,6,12,24h, 或者 0,4,8,16,24h  各种转录因子的活化时间也不是十分固定，看是哪个通路的，不过一般而已，2h左右就可以检测到，既然是刺激入核， ...

谢谢你的回答，我的问题不是刺激使转录因子入核，而是使转录因子的蛋白水平表达增加。
赞一下 回复此楼
3楼2014-07-07 16:23:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

72度冰

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by lmc2537 at 2014-07-07 16:23:19
谢谢你的回答，我的问题不是刺激使转录因子入核，而是使转录因子的蛋白水平表达增加。...

一样的，我的意思是转录因子表达增高最后都会入核的，因为不入核的就不叫转录因子了…… 你可以先只做0,4,8h, WB检测应该就足够了。不过如果你的靶分子就是转录因子，例如你的目的分子可以使这个转录因子去泛素化从而表达增高，那么有必要多做一些时间点，如上贴中我所说的就很规范了。
赞一下 回复此楼
吾非予苍生，乃为汝，魁于天下。
4楼2014-07-07 16:27:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

72度冰

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-07-07 19:02:35
lmc2537: 金币+3, 明白，谢谢！ 2014-07-08 11:33:23
如果你是为了做一种单纯性的特殊刺激，去检测一种转录因子诱导表达的情况，例如用LPS去刺激细胞，检测IRF3的表达情况，由于LPS的特殊性以及剂量依赖性，低剂量24h也能看到变化，高剂量16h左右就恢复了。但是不管是什么刺激，我个人建议，最好的效果还是做时间点，0,2,4,6,12,24h 去检测。
赞一下(1人) 回复此楼
吾非予苍生，乃为汝，魁于天下。
5楼2014-07-07 16:31:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lmc2537 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭