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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » DNA提取
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swach

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 爱骨头的鱼 at 2014-07-08 12:49:58
是按照试剂盒的步骤提取的。涡旋振荡是按照说明书上的时间，5分钟。其中有一步挺重要的，第六步，就是要在-20放置1小时左右，这样会更有利于提取DNA。...

恩，我没有在-20度放过一个小时，一般就只放半个小时。还有一个问题就是，第六步离心之后，你能看到DNA沉淀?我很少看到。
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11楼2014-07-08 17:58:41
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星空归来

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
悠悠飘杨(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-11 11:10:25
我现在也在提微生物DNA，浓度能达到2000多纳克每微升，但是纯度不太好，用试剂盒纯化效果不好，在找其他办法纯化。浓度低，可能是取样量过多，细菌破壁不充分。适当减少样品用量试试看
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你若信，我便坚守
12楼2014-07-10 21:30:49
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爱骨头的鱼

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by swach at 2014-07-08 17:58:41
恩，我没有在-20度放过一个小时，一般就只放半个小时。还有一个问题就是，第六步离心之后，你能看到DNA沉淀?我很少看到。...

我也是
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13楼2014-07-10 23:20:37
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swach

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 星空归来 at 2014-07-10 21:30:49
我现在也在提微生物DNA，浓度能达到2000多纳克每微升，但是纯度不太好，用试剂盒纯化效果不好，在找其他办法纯化。浓度低，可能是取样量过多，细菌破壁不充分。适当减少样品用量试试看

你用什么试剂盒提的基因组，浓度这么高，你一般破壁多长时间啊？
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14楼2014-07-11 14:48:39
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wrnwrn

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
悠悠飘杨: 金币+1 2014-07-29 10:22:16
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-08-21 16:08:58
对于腐殖质含量高的土样， 很多DNA提取方法或者试剂盒都力不从心，经常提起不出来，或者有降解， 或者纯度不高， 或者产量不高，等等。
试试这种方法， 应该有帮助：
http://link.springer.com/article/10.1007%2Fs10529-014-1591-5
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15楼2014-07-29 09:07:49
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