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guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)

[交流] 重组质粒快速鉴定的问题

最近在网上看到关于重组转化子的快速鉴定,说可以在平板上挑单斑于LB液体培养基中,培养一段时间后取1ML菌液离心后用S1悬浮,然后加入酚、氯仿、异戊醇(25:24:1)抽提,然后离心,取上清液电泳。

网上有人说这样可以看到两条带,最上为基因组DNA,下面为质粒。

可是我这样做过后电泳,发现虽然有两条带,可是两条带离的很近,上面那条带根本不象基因组,因为基因组不可能跑得这么快吧,请问高人这是什么呢?

还有就是这种方法抽提出来的质粒和试剂盒提取的质粒跑的速度一样吗?谢谢
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

质粒有多种高级结构,比如超螺旋结构、环状闭合结构。所以我认为是不同高级结构导致。
2楼2008-03-30 20:17:53
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guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)

楼上的回答不对,因为用这种方法抽提的质粒据说只有一种构象
3楼2008-03-30 20:24:45
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