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snoopy东东

新虫 (初入文坛)

[求助] LAMP为什么结果突然变了,快疯了,求解答!已有2人参与

我用的HNB染料,之前订出多对引物,筛了几对之后,出现一对特异性较好的,和其他菌在一起,做了特异性,只有目标菌出现阳性,之后开始做灵敏度和其他实验,昨天突然想起重新做下特异性,拍张清楚的照片,但是悲剧的是,除了水,全显阳性,想到有可能是污染,但是水一直是阴性,而且结果不是很稳定,有时候除了水全阳了,有时候大概一半阳性一半阴性,操作一直蛮注意的,应该不会有什么问题吧,换了其他人保存的非目标菌,还是一样,引物不特异了,求大神解释。
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爱上鱼……

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
lamp真不好说,用pcr做特异性结果很好,但是一上lamp就出峰……感觉很不靠谱……
懒病又犯了……
3楼2014-07-04 13:16:14
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yuren2009

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
snoopy东东: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-07-05 16:44:23
把你的引物重新稀释或者用目标菌的特异引物检测下所有菌看是否污染,要么LAMP引物本身就不好,只是偶然的成功。
学习使你立于不败之地
2楼2014-07-04 10:53:17
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snoopy东东

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yuren2009 at 2014-07-04 10:53:17
把你的引物重新稀释或者用目标菌的特异引物检测下所有菌看是否污染,要么LAMP引物本身就不好,只是偶然的成功。

嗯嗯,是的,我准备重新稀释引物,再自己提些非目标菌的基因组,如果还是不行,就只能换引物了。。。
4楼2014-07-05 16:42:59
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seekinglove

铜虫 (正式写手)

你的反应体系组成是什么啊?会不会体系不稳定造成的非特异的扩增?
6楼2014-07-25 15:44:24
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