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minhappy

[交流] 过G-50凝胶柱的进来帮下忙

求助:过AKTAG-50凝胶柱时,为什么总是洗脱到215ml时候机器总是报警,提示说柱压超限,然后就停机了.(设置的是1MPa) 柱子1.6X75
过从组织提取的粗提液,流动相:磷酸缓冲液

希望高人给指点下,谢谢了.
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winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客

预装柱自行重新装柱,效率会有很大降低,没有专门的装柱器帮助,很难做出很好的结果。貌似我记得G-50多用于脱盐,我用过G-25、G-75、S-200和S-500,没有见过类似的事件。在线滤器在使用后(只要分离过蛋白),一般都会压力升高,需要超声降低阻力。当流动相的粘性增大也会导致压力升高,比如20%的乙醇。AKTA的机器十分容易背景压力高,很郁闷的事情。但是你说是到一定流量的时候就显示压力超压,这个应该不是操作问题,貌似是程序有点问题(个人看法),或者你的样品中有什么特定大小的杂质?
询问GE的技术支持貌似没有什么用途,大部分只会念说明书,我的问题大多数都没有解决,后来我就懒得问了。
上面有位虫友说你的压力过高,我认为不对,因为他用的是CL-6B,我用过的,材料和G-50不一样,且前者的分离颗粒非常大,在10000-4000000(略大于1000000)之间,而G-50的分离范围在1000-45000之间,前者在分离时承受的压力要远远小于后者。
具体的压力参数明天再给你搞出来吧,有段时间没有作分子筛了。
For my life!
10楼2008-04-17 23:28:08
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puma2003

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
好像分子筛就是流速越来越慢,我没用过AKTA,我常温过柱的时候就是越来越慢,所以我认为压力上升是正常的,你是否可以中途再设置一下啊?呵呵,不懂瞎说
2楼2008-03-30 12:26:38
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minhappy

谢谢楼上的
还有其他可能的原因吗??
3楼2008-03-31 23:50:28
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thaibin

金虫 (正式写手)

★ ★
asr(金币+2,VIP+0):thank u!
你用的是安玛西亚出的预装柱吗? 如果是的话,在设定程序的时候,柱保护压力,流速都是默认的。我想你设的压力确实很高了,我没用过G-50,我用的sepharose CL-6B等凝胶柱一般 都是0.2Mpa(说明书中有最大耐受压力,以及流速等信息),你再查查G-50的说明书吧。 还有定期清洗在线滤器。在线滤器堵了,也会导致压力上升。还有洗脱液最好是用.22的膜过滤的,祝好运!
Dreamit!Beit!
4楼2008-04-01 15:02:24
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