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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 酵母基因组提取
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反对派

银虫 (正式写手)
★ ★ ★
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-07-16 13:12:41
我用珠磨法抽提过GS115的基因组，条带很好看的。你的实验存在可能存在以下问题：
1.感觉你的胶浓度似乎大于0.7%（注意如何得到准确浓度的胶）；或者你的电泳时间太短，条带没有分开；
2.你的marker应该标示出来，才能让大家帮你分析，感觉你的基因组是提到了(最上面的那一条带应该是20Kbp 左右)，最下那一堆弥散的应该是RNA没有除干净。
希望能帮到你。
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11楼2014-07-07 09:29:09
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动力小火车

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 反对派 at 2014-07-07 09:29:09
我用珠磨法抽提过GS115的基因组，条带很好看的。你的实验存在可能存在以下问题：
1.感觉你的胶浓度似乎大于0.7%（注意如何得到准确浓度的胶）；或者你的电泳时间太短，条带没有分开；
2.你的marker应该标示出来， ...

谢谢，确实是没有注意胶的浓度，仍然沿用了之前1%的胶。我之后用蜗牛酶法提到了，而且非常干净。谢谢啊
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12楼2014-08-27 12:36:36
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learningying

铁杆木虫 (著名写手)
下面是我最近的实验步骤，结果不错的。你可以尝试下,好运！
1、取几只干净的2ml的EP管，编号、标记。
2、将过夜培养的酵母进行离心5000r.pm，3 mins收集。
3、加入500 ulTE震荡混匀，离心5000r.pm，3 mins；弃上清。
4、重复上面的步骤，清洗干净酵母细胞，使不含有杂质。
5、每个EP管中加入200 ul的TE，涡旋，震荡混匀。
6、用注射器在每个EP管的盖子上穿刺一个小孔，避免加热的过程中，盖子胀开。
7、沸水中煮沸10 min，离心12000r.pm，3 mins；
8用3ul上清作为模板，进行PCR反应。做好对照进行观察。
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加油，天道酬勤
13楼2014-11-06 16:10:45
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vivd娟

金虫 (小有名气)
我们是用promega试剂盒提的，没问题的啊，电泳条带也清晰的。
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14楼2015-07-27 08:34:04
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