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反对派

银虫 (正式写手)

★ ★ ★
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流! 2014-07-16 13:12:41
我用珠磨法抽提过GS115的基因组,条带很好看的。你的实验存在可能存在以下问题:
1.感觉你的胶浓度似乎大于0.7%(注意如何得到准确浓度的胶);或者你的电泳时间太短,条带没有分开;
2.你的marker应该标示出来,才能让大家帮你分析,感觉你的基因组是提到了(最上面的那一条带应该是20Kbp 左右),最下那一堆弥散的应该是RNA没有除干净。
希望能帮到你。
11楼2014-07-07 09:29:09
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动力小火车

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 反对派 at 2014-07-07 09:29:09
我用珠磨法抽提过GS115的基因组,条带很好看的。你的实验存在可能存在以下问题:
1.感觉你的胶浓度似乎大于0.7%(注意如何得到准确浓度的胶);或者你的电泳时间太短,条带没有分开;
2.你的marker应该标示出来, ...

谢谢,确实是没有注意胶的浓度,仍然沿用了之前1%的胶。我之后用蜗牛酶法提到了,而且非常干净。谢谢啊
12楼2014-08-27 12:36:36
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learningying

铁杆木虫 (著名写手)

下面是我最近的实验步骤,结果不错的。你可以尝试下,好运!
1、取几只干净的2ml的EP管,编号、标记。
2、将过夜培养的酵母进行离心5000r.pm,3 mins收集。
3、加入500 ulTE震荡混匀,离心5000r.pm,3 mins;弃上清。
4、重复上面的步骤,清洗干净酵母细胞,使不含有杂质。
5、每个EP管中加入200 ul的TE,涡旋,震荡混匀。
6、用注射器在每个EP管的盖子上穿刺一个小孔,避免加热的过程中,盖子胀开。
7、沸水中煮沸10 min,离心12000r.pm,3 mins;
8用3ul上清作为模板,进行PCR反应。做好对照进行观察。
加油,天道酬勤
13楼2014-11-06 16:10:45
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vivd娟

金虫 (小有名气)

我们是用promega试剂盒提的,没问题的啊,电泳条带也清晰的。
14楼2015-07-27 08:34:04
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