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铁虫 (初入文坛)

[交流] 质粒双酶切切散问题

各位虫子，
我在实验中用EcoRⅠ和Hind Ⅲ 双酶切1301质粒时老切散，求助啊！

1楼 2008-03-28 14:28:17

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★ ★
asr(金币+2,VIP+0):thank u! 欢迎常来o(∩_∩)o...

可能是酶切体系不太好，酶切时间太长了

2楼2008-03-28 17:07:32

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木虫 (正式写手)

酶切出问题可能的原因很多，buffer，条件，质粒，还有酶。
如果从找原因的角度看就应该作单酶切，再分析结果。
1。如果单酶切都没有问题就直接回收再单酶切就可以了。
2。如果有一种酶的酶切有问题就换酶‘
3。如果都有问题就看其他同学的酶切结果如何，如果人家正常，应该体系没有问题，在质粒。

3楼2008-03-28 17:23:41

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铁虫 (初入文坛)

谢谢啊！我的酶切效果关键是不稳定，有时切的好，有时切的不好。我们也换用新酶做过，还是效果不理想。酶切体系是原来一直用的，就是最近才出现效果不好的，体系应该没问题的。疑惑啊！……

4楼2008-03-28 19:11:34

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