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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 关于荧光定量PCR产物直接克隆的问题
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lyz65956

木虫 (正式写手)

[求助] 关于荧光定量PCR产物直接克隆的问题

有没有人做过直接用荧光定量PCR产物克隆？
想做标准品因此把基因克隆，以前试过普通PCR产物直接克隆没问题，不知道将用SYBR green染料进行荧光PCR的产物可否连上？
是不是需要纯化或者只能用普通PCR扩增的产物才可以克隆？
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1楼 2014-06-26 12:38:21
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lyz65956

木虫 (正式写手)
gyesang: 回帖置顶 2014-07-27 20:58:53
引用回帖:
16楼: Originally posted by 未婚 at 2014-07-20 20:55:01
关注哦 没有见过呢  现在做了么？结果怎样？

没有问题 可以直接做的 不过我用的是全式金的TA试剂盒，据说里面的离子等条件不会影响克隆，只要条带单一可以直接进行克隆反应，结果挺理想的。
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17楼2014-07-21 08:53:05
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Beryl_xu

铁虫 (小有名气)
怎么感觉有点儿不对。荧光定量PCR是做定量用的，没有谁直接把产物拿去做酶切连接成克隆吧。
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12楼2014-06-27 09:47:20
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lyz65956

木虫 (正式写手)
gyesang: 回帖置顶 2014-07-27 20:59:03
事实证明可以这样做的。我就是为了克隆测序，没有更进一步要求，用TA克隆就完成克隆并测序成功的。谢谢 小伙伴们的祝福
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13楼2014-07-03 14:42:09
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mocca123

禁虫 (小有名气)
★ ★
gyesang: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励回帖交流经验！ 2014-07-27 20:58:45
gyesang: 回帖置顶 2014-07-27 20:59:00
本帖内容被屏蔽
14楼2014-07-04 12:55:08
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查看全部 18 个回答
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