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yuehongshan

金虫 (小有名气)

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[求助] 新手求指教！关于氨基酸分析仪或HPLC分析氨基酚组分和含量的已有4人参与

各位大神，本人是微生物专业的，需要分析菌株肽聚糖氨基酸的组成及含量。之前用氨基酸分析仪分析过一次，出现了除18种基本氨基酸之外的峰，可能是DAB或者鸟氨酸。现在我的问题有：
1、我需要买DAB和鸟氨酸的标准品，根据文献，DAB应该是L型，鸟氨酸是D型，用氨基酸分析仪或者HPLC能分析构型吗？如果不能的话我买标准品的时候是不是就不用管是L还是D的了？
2、我查了一下标准品都是衍生的，盐酸盐或者溴酸盐什么的，这个可以用吗？用的时候需要注意什么?
3、我看那个标准品纯度有98%和99%的，价格差很多，这个必须用高纯的吗？用98%的行吗？
4、这两种氨基酸在分析的时候峰会不会和18种基本氨基酸的峰重合呢？
5、如果哪位大神有具体步骤给我参考一下就更好啦
第一次接触这些，真心求教，万分感谢！

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1楼2014-06-23 21:34:49

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linrchun

木虫 (著名写手)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
yuehongshan: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢！ 2014-06-29 19:28:19

1：分析氨基酸构型要用手性柱才行，这个需要定位，比如要确定D鸟氨酸的话首先要在手性柱上分开两个峰，然后在同一条件下分析您的样品，如果和D构型出峰时间重合，那么您的产物就是D型鸟氨酸，如果和L型重合则是L型鸟氨酸，当然前提是您得首先确认得到的产品是鸟氨酸才能用这个方法。
2：分析手性化合物的话，首先要选择一个消旋体，或者两个构型的化合物混合进样，是否成盐什么形式的盐不影响分析结果，但是如果是其他形式的衍生物的话是不可以的，比如：丙氨酸盐酸盐和硫酸盐以及丙氨酸这三个东西在色谱柱上出峰时间在同一条件下没有差别，如果是丙氨酸甲酯的话肯定不行。
3、标准品的纯度98%的和99%的影响应该不大，因为你主要是个定位作用，知道主峰是哪个东西就行了
其他的我感觉也差不多了，氨基酸分析的话可以站内联系我。。。。
第一次接触这些，真心求教，万分感谢！