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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 前处理 » 微生物脂肪酸甲酯化
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lvbolantao

木虫 (著名写手)

[求助] 微生物脂肪酸甲酯化 已有1人参与

请教大家几个问题, 最近做酵母脂肪酸检测，做了几次不太成功，步骤是这样的，先提取脂质，然后冻干，加入含有14%三氟化硼的甲醇溶液600微升，100度水浴25min，迅速冷却。
做的过程中有几个问题：
1，我的反应容器是离心管，材质有要求吗，必须是玻璃的还是塑料的也行？
2，离心管是漩口带盖的，在沸水浴时，反应体积还是会减少，这个影响大吗？
3，反应完，正常应该是什么颜色，反应时间有严格要求吗?
谢谢大家
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活在当下
1楼 2014-06-23 14:19:11
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lvbolantao

木虫 (著名写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 辛格王朝 at 2014-07-23 13:01:03
我是对一两个菌做鉴定，已经做过16srRNA基因测序，想进一步鉴定，老板又没钱做全序列测序，所以想做脂肪酸的测定~但是好像还要买一个脂肪酸甲酯的谱库...

谱库就不太知道了，可那本书就像一本谱库和菌种鉴定手册，列出了各种菌的特征脂肪酸及含量，不行和老板商量下，让老板买那本书吧
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活在当下
16楼2014-07-23 15:54:52
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baixi2009

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lvbolantao: 金币+3, ★有帮助, 谢谢 2014-06-24 08:26:10
lvbolantao: 金币+7, ★★★很有帮助 2014-09-26 09:09:32
楼主的脂质取了多少g，需保证三氟化硼甲醇溶液过量。也可考虑采用0.5mol/LKOH溶液进行甲酯化。无论使用哪种甲酯化方法，都要使甲酯化试剂过量。
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2楼2014-06-23 21:06:01
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lvbolantao

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by baixi2009 at 2014-06-23 21:06:01
楼主的脂质取了多少g，需保证三氟化硼甲醇溶液过量。也可考虑采用0.5mol/LKOH溶液进行甲酯化。无论使用哪种甲酯化方法，都要使甲酯化试剂过量。

谢谢您的回复，细胞是300mg，还想问一下正常反应完是什么颜色？谢谢
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活在当下
3楼2014-06-24 08:30:12
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多多8765

铁杆木虫 (正式写手)
直接用醇钠吧（sigma），不要这么麻烦的，反应体系最好是玻璃，
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学会坚持，敢于胜利
4楼2014-06-24 11:52:45
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查看全部 17 个回答
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