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lvbolantao

木虫 (著名写手)

[求助] 微生物脂肪酸甲酯化 已有1人参与

请教大家几个问题, 最近做酵母脂肪酸检测,做了几次不太成功,步骤是这样的,先提取脂质,然后冻干,加入含有14%三氟化硼的甲醇溶液600微升,100度水浴25min,迅速冷却。
做的过程中有几个问题:
1,我的反应容器是离心管,材质有要求吗,必须是玻璃的还是塑料的也行?
2,离心管是漩口带盖的,在沸水浴时,反应体积还是会减少,这个影响大吗?
3,反应完,正常应该是什么颜色,反应时间有严格要求吗?
谢谢大家
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活在当下
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辛格王朝

新虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by lvbolantao at 2014-07-22 10:26:16
听说过,有一本书叫微生物脂肪酸生态学,你可以看一看...

好贵啊
做不好实验的苦逼
12楼2014-07-22 20:35:06
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baixi2009

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lvbolantao: 金币+3, ★有帮助, 谢谢 2014-06-24 08:26:10
lvbolantao: 金币+7, ★★★很有帮助 2014-09-26 09:09:32
楼主的脂质取了多少g,需保证三氟化硼甲醇溶液过量。也可考虑采用0.5mol/LKOH溶液进行甲酯化。无论使用哪种甲酯化方法,都要使甲酯化试剂过量。
2楼2014-06-23 21:06:01
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lvbolantao

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by baixi2009 at 2014-06-23 21:06:01
楼主的脂质取了多少g,需保证三氟化硼甲醇溶液过量。也可考虑采用0.5mol/LKOH溶液进行甲酯化。无论使用哪种甲酯化方法,都要使甲酯化试剂过量。

谢谢您的回复,细胞是300mg,还想问一下正常反应完是什么颜色?谢谢
活在当下
3楼2014-06-24 08:30:12
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多多8765

铁杆木虫 (正式写手)

直接用醇钠吧(sigma),不要这么麻烦的,反应体系最好是玻璃,
学会坚持,敢于胜利
4楼2014-06-24 11:52:45
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